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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR后的DNA产物跑电泳久了条带为什么会消失或变弱？
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dongfangzz

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR后的DNA产物跑电泳久了条带为什么会消失或变弱？ 已有9人参与

我用RNA逆转录cDNA后，又做了PCR。当产物跑电泳25分钟，曝光观察条带清晰。但感觉没充分跑开，有接着跑了6分钟.条带几乎消失了，marker中的几个条带个别的也消失了。
为什么这样子？难道DNA降解了？
一次跑电泳后：
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=9904601ilr1sawczuqcllq6
二次电泳后：
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=9904602bqv5qj1w5xtuexis
确定第二次不是曝光的问题

[ Last edited by dongfangzz on 2010-9-12 at 09:38 ]
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1楼 2010-09-12 09:35:32
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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amisking(金币+1): 2010-09-12 15:40:32
因为紫外会淬灭EB……重新染一下就可以了
（没看附件，其他的荧光染料也会被淬灭的，程度上可能有差异）
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3楼2010-09-12 10:25:14
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linysm

银虫 (小有名气)
胶跑热了吧，散开了，DNA溜了。
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10楼2010-09-12 16:50:12
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bigboy123

铜虫 (小有名气)
★ ★
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amisking(金币+1):鼓励交流 2010-09-12 15:40:28
感觉是电泳的问题，是不是loading buffer加多了，被盖住了。
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供应PCR增量剂
2楼2010-09-12 10:01:42
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dongfangzz

银虫 (小有名气)
在这里先谢谢大家了!
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4楼2010-09-12 15:11:51
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杜杜

金虫 (小有名气)
★
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重新染色试试
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5楼2010-09-12 15:43:25
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dongfangzz

银虫 (小有名气)
怎么重新染色呀?
重新加样跑电泳?
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6楼2010-09-12 15:53:49
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lixiaomin8611

金虫 (初入文坛)
★
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直接用EB染液染胶啊
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7楼2010-09-12 16:01:41
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dongfangzz

银虫 (小有名气)
整块胶都要染吗
还是只染条带处
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8楼2010-09-12 16:03:50
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feiye2214

木虫 (正式写手)
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lstt09nk(金币+2):感谢回复，希望对楼主有所帮助~ 2010-09-12 17:13:55
把整块胶都扔进EB溶液中染呗，我们这边都是这样染的，不在胶中加EB，跑胶后把胶块放进EB染15-20min就好
这样，电泳槽就不会被EB污染了，只是多耗点时间
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9楼2010-09-12 16:47:18
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