24小时热门版块排行榜    

查看: 4676  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

niuniu2010

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】带GST标签的重组蛋白的纯化? 已有11人参与

将带GST标签的重组蛋白进行酶切,怎样分离GST标签,目的蛋白及所用的酶切酶?能否用分子筛、跑胶等方法分离且保持目的蛋白的活性?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):积极的大可~~欢迎常来~ 2010-09-15 00:11:26
GST在溶液中一般都是二聚体形式。

一般来说我们酶切后更换至binding buffer中再次过GST柱,标签和酶(pre酶)都挂在柱子上,目的蛋白穿透。

离子交换柱能不能分开要看你蛋白的性质了
6楼2010-09-14 23:17:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

jasco

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-09-11 00:44:29
酶切好再次过柱,gst标签被吸附,你的目的蛋白在流穿里面,
2楼2010-09-10 16:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+2):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-09-11 00:44:36
你的目的蛋白由多大,如果差异很大可以过分子筛分离。如果差别很小,可以过亲和纯化柱分离。只要操作得当都能保持蛋白活性除非你的蛋白很容易变形就需要多加注意了。
52187644
3楼2010-09-10 22:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

niuniu2010

铜虫 (初入文坛)

我的目的蛋白分子量有16.7KD左右,加上GST标签有42.7KD左右大小,酶切酶有37KD左右。
大小差异不大,分子筛是否不能用呀?离子交换柱能用吗?
实验室现有分子筛和离子交换柱的填料,老板不愿买亲和柱,让我想办法解决,很迷茫呀,哪位牛人能帮忙解决问题呀,不胜感激。谢谢!
5楼2010-09-11 11:00:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +5 bjdxyxy 2026-08-26 5/250 2026-09-01 17:54 by 小伟大博士
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见