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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】sds胶晕开的问题
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felix2004

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】sds胶晕开的问题

各位帮帮忙，看看我这个胶是怎么回事，小分子量区域歪歪扭扭，还有marker晕的很开是不是脱色时间太长的原因，还是胶或者marker本身的原因。破菌上清和透析液的蛋白条带很淡，怎么解决？

怎样的胶才能符合发文章的需要啊？
如果有sds的详细资料也请发我一份，感谢大家
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我眼里只有你——小金币！！
1楼 2010-09-10 10:32:56
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
felix2004(金币+1):谢谢参与
貌似marker有问题
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2楼2010-09-10 11:41:51
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hflf

金虫 (小有名气)
★
felix2004(金币+1):谢谢参与
felix2004(金币+1):谢谢 2010-09-10 11:47:51
marker降解了吧，我们这边也是，后来用了-20°刚拿出来的marker就好了，蛋白胶也出现过扭曲的，可能是玻璃板没洗干净，
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行到水穷处，坐看云起时！
3楼2010-09-10 11:45:41
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)
★
felix2004(金币+1):谢谢参与
跑胶的电压太高导致热量太多（或者是BUFFER是用的旧的），所以低温跑会好很多的。
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4楼2010-09-10 12:00:20
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2009227004

金虫 (正式写手)
★ ★
felix2004(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):鼓励交流~ 2010-09-10 15:31:37
Marker降解了，可以拿去加热一下！！！100摄氏度10分钟，至少条带，其他的都还好，有可能是胶没有混匀！！或者你的样品里面含有干扰试剂！！破坏了蛋白的结构！！颜色淡的话，你烤蓝的时候多烤一会！！！
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当别人都在假装正经的时候，我就假装不正经。
5楼2010-09-10 13:26:03
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烟大考研

金虫 (正式写手)
★
felix2004(金币+1):谢谢参与
felix2004(金币+1): 2010-09-10 18:45:56
看你的胶，感觉有好多污染点，是不是试剂没有过滤，我们这边用的试剂都经过0.45um过滤的，跑出来就没有点了。
Marker降解了，就是这种情况，我们最近做实验也出现过Marker晕的现象，结果用新Marker一带就对比出来了，建议换新Marker。
破菌后，上样时间要尽量短，防止胞内酶降解。
另外你的染色还是可以的，已经不浅了，就是蛋白量少。蛋白可以浓缩下。
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
6楼2010-09-10 15:47:34
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