24小时热门版块排行榜    

查看: 2305  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

cheo163

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】小鼠单抗做WB的问题

我现在手上有一个需要鉴定的小鼠单抗,但是查资料显示这种蛋白只在鼠脑中表达,表达大小为25kd。但问题是我如果用鼠脑的组织样转膜做western,显色时鼠脑中的IgG轻重链也一起显示(大概55kd/25kd),就没办法确定我的鼠抗是不是阳性,不知道该怎么解决?


[ Last edited by cheo163 on 2010-9-3 at 16:30 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
1949stone(金币+1):高人指点一下 2010-09-03 19:10:57
silicare(金币+2):谢谢参与 2010-09-04 08:08:58
引用回帖:
Originally posted by cheo163 at 2010-09-03 16:28:21:
我现在手上有一个需要鉴定的小鼠单抗,但是查资料显示这种蛋白只在鼠脑中表达,表达大小为25kd。但问题是我如果用鼠脑的组织样转膜做western,显色时鼠脑中的IgG轻重链也一起显示(大概55kd/25kd),就没办法确定 ...

什么叫鼠脑中的IgG的H和L chain也显示,鼠脑中有抗体么?你的表述是不是想说在你用鼠脑组织作WB的时候,为什么H和L chain也看得到?
52187644
3楼2010-09-03 17:38:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

cheo163

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2010-09-03 17:38:17:



什么叫鼠脑中的IgG的H和L chain也显示,鼠脑中有抗体么?你的表述是不是想说在你用鼠脑组织作WB的时候,为什么H和L chain也看得到?

对吧,就是这样,然后怎样才能不把那个H和L chain显色出来

[ Last edited by cheo163 on 2010-9-3 at 20:45 ]
4楼2010-09-03 20:40:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)

★ ★
amisking(金币+2):鼓励一下! 2010-09-03 21:54:54
而且小鼠还不是含有自身IgG,鼠脑中也有阿,制成组织lysis时,因为要煮,就把H和L chain分开了,加了抗鼠的二抗不就显色了~~
5楼2010-09-03 20:58:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
cheo163(金币+1):我目前正打算这么做,看看结果怎么样吧,希望有更好的方法 2010-09-03 23:03:14
scelab(金币+5):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-03 23:13:34
我的印象是,不是所有的IgG能够通过血脑屏障。就像胎盘屏障一样。
所以你说的自身抗体是否能够进入鼠脑我有些怀疑。如果按照你说的他能够进入的话,是有可能在WB检测的时候检测到三条带。即H和L chain和目的带。那你可以用鼠脑直接WB,加二抗能够显色说明他分泌抗体。然后如果想分开可以用未标记的羊抗鼠二抗和你理解后的组织作用,离心,然后电泳看是否能够杂出一条带。
希望对你有帮助,也乐于与你讨论。
good luck
52187644
6楼2010-09-03 22:45:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +4 墨墨漠 2026-03-18 4/200 2026-03-19 21:46 by wang_dand
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +7 Ymlll 2026-03-18 10/500 2026-03-19 19:43 by maocaozhuxi
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 10/500 2026-03-19 16:05 by 余麟余
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 274求调剂 +6 S.H1 2026-03-18 6/300 2026-03-19 09:34 by 花店相见
[考研] 材料专业求调剂 +5 hanamiko 2026-03-18 5/250 2026-03-18 20:19 by 星空星月
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +5 梨花珞晚风 2026-03-17 5/250 2026-03-18 14:49 by haxia
[考研] 311求调剂 +11 冬十三 2026-03-15 12/600 2026-03-18 14:36 by 星空星月
[考研] 0854,计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 0703化学336分求调剂 +6 zbzihdhd 2026-03-15 7/350 2026-03-18 09:53 by zhukairuo
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 278求调剂 +5 烟火先于春 2026-03-17 5/250 2026-03-18 08:43 by 星空星月
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考研] 26考研求调剂 +6 丶宏Sir 2026-03-13 6/300 2026-03-17 16:13 by 醉在风里
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂 +3 嘉年新程 2026-03-15 3/150 2026-03-15 13:58 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
信息提示
请填处理意见