应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】可不可以不构建载体
51/1返回列表
查看: 1260  |  回复: 9
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

痴书小孩

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】可不可以不构建载体已有9人参与

请问大家，为什么要构建载体啊，我可不可以跑完PCR，电泳后回收直接拿去测序，为什么连到质粒上还要转到大肠杆菌里面去？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2010-08-26 08:58:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiani_tan

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用载体测序的话，一般就是简单的TA克隆，也不是很麻烦，而直接用PCR产物的话需要纯化，还有降解的可能
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-08-27 21:37:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

周_yan

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-08-26 09:24:01
我认为电泳回收后可以直接测序，而连入T载体再去测序一是为了测序更容易；二是方便后面构建表达载体。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-08-26 09:12:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cheo163

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-08-26 09:27:26
把你回收的产物和你pcr的引物一起送去测，我觉得是可以的~~
只是这样回收产物不是很好保存吧~~
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-08-26 09:23:11
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jukongka

铁杆木虫 (著名写手)

年度最忠心木虫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
二楼说的很对，如果后续要做表达研究的话，是克隆载体测序较好；
如果是仅仅是为了获得部分序列信息的话，不需要克隆，PCR产物直接测序即可
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-26 11:05:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭