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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR 切胶回收
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lifenfang

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR 切胶回收

请问各位，我DNA片段PCR后跑胶只有一条带，但是切胶回收后再跑胶时就有两条带了，请问这是怎么回事呀？
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1楼 2010-08-23 15:09:38
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张力民1598

铜虫 (小有名气)
lifenfang(金币+1): 2010-08-23 21:19:01
1.污染了。1.PCR后跑电泳没分开，其实是两条带。
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2楼2010-08-23 15:13:08
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
lifenfang(金币+2): 2010-08-23 21:18:57
一般来说，是第一次电泳没有分开，污染的可能性不大
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3楼2010-08-23 15:29:57
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won7

金虫 (小有名气)
lifenfang(金币+2): 2010-08-23 21:18:50
我也遇到过这种情况，后来换胶回收试剂盒解决问题。建议换胶回收试剂盒，此外确保LOADING BUFFER没有DNA污染。
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4楼2010-08-23 16:20:22
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夜龙舞

金虫 (小有名气)
★ ★
amisking(金币+2): 2010-08-23 21:04:49
lifenfang(金币+2): 2010-08-23 21:18:45
两条带是否挨的很近，如果是说明你跑pcr鉴定时加的样太多一般3微升足够了。应该鉴定的时候就是两条挨着的带，加的样多了，荧光太宽。再重新做一次，看看。
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5楼2010-08-23 16:41:09
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