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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】多糖蛋白的电泳检测
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haichang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】多糖蛋白的电泳检测

我是做蛋白修饰的，将多糖共价结合到蛋白上。修饰后的蛋白用lory法能够检测到蛋白的存在（约1mg/ml），但是用SDS-PAGE电泳法跑电泳的时候却看不到条带，请大家帮我分析一下原因，谢谢
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时不我待
1楼 2010-08-10 15:52:48
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yaojc

木虫 (正式写手)
haichang(金币+1): 2010-08-10 17:08:50
你的分子量有多大，加样前有沸水浴吗
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专注、专心、专业
2楼2010-08-10 16:54:45
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yaojc

木虫 (正式写手)
haichang(金币+1): 2010-08-10 17:08:57
你应该把你的浓缩胶染色看下，是不是蛋白凝聚导致没有出胶啊
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专注、专心、专业
3楼2010-08-10 17:03:42
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haichang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-08-10 16:54:45:
你的分子量有多大，加样前有沸水浴吗

我的分子量大约在60~110KD，加样前也已经沸水浴了。我的样品这样处理的，在超滤前后测得蛋白的值表明蛋白没有丢失，1mg/ml指的就是超滤后蛋白含量，但是超滤后电泳没有带显示。
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时不我待
4楼2010-08-10 17:23:29
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haichang

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-08-10 17:03:42:
你应该把你的浓缩胶染色看下，是不是蛋白凝聚导致没有出胶啊

不是这个原因，已经排除了。而且其他的步骤纯化后跑胶也有带显示，只是超滤 后有蛋白含量，但是电泳胶没带显示。

谢谢回复！
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时不我待
5楼2010-08-10 17:26:11
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henkally

禁虫 (著名写手)
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-12 05:17:24
本帖内容被屏蔽
6楼2010-08-10 17:31:06
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tinaliang

银虫 (正式写手)
haichang(金币+1): 2010-08-11 18:37:50
会不会是蛋白含量太少，染色看不出来，你可以选择其他看蛋白方法。或者加大上样量
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7楼2010-08-10 17:37:19
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boying0928

至尊木虫 (著名写手)
haichang(金币+1): 2010-08-19 10:03:27
1ug/ul 样品量很大了，应该考虑其他原因，要不放张图片上来！
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热爱这里。
8楼2010-08-11 22:19:45
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真真xu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
亲故，你得问题是怎么解决的，能不能分享一下~
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9楼2016-03-14 10:40:10
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酒红色葡

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
亲，我和你差不多的

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10楼2016-05-17 15:28:02
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