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haichang

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】多糖蛋白的电泳检测

我是做蛋白修饰的,将多糖共价结合到蛋白上。修饰后的蛋白用lory法能够检测到蛋白的存在(约1mg/ml),但是用SDS-PAGE电泳法跑电泳的时候却看不到条带,请大家帮我分析一下原因,谢谢
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时不我待
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yaojc

木虫 (正式写手)

haichang(金币+1): 2010-08-10 17:08:50
你的分子量有多大,加样前有沸水浴吗
专注、专心、专业
2楼2010-08-10 16:54:45
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yaojc

木虫 (正式写手)

haichang(金币+1): 2010-08-10 17:08:57
你应该把你的浓缩胶染色看下,是不是蛋白凝聚导致没有出胶啊
专注、专心、专业
3楼2010-08-10 17:03:42
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haichang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-08-10 16:54:45:
你的分子量有多大,加样前有沸水浴吗

我的分子量大约在60~110KD,加样前也已经沸水浴了。我的样品这样处理的,在超滤前后测得蛋白的值表明蛋白没有丢失,1mg/ml指的就是超滤后蛋白含量,但是超滤后电泳没有带显示。
时不我待
4楼2010-08-10 17:23:29
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haichang

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yaojc at 2010-08-10 17:03:42:
你应该把你的浓缩胶染色看下,是不是蛋白凝聚导致没有出胶啊

不是这个原因,已经排除了。而且其他的步骤纯化后跑胶也有带显示,只是超滤 后有蛋白含量,但是电泳胶没带显示。

谢谢回复!
时不我待
5楼2010-08-10 17:26:11
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henkally

禁虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-08-12 05:17:24
本帖内容被屏蔽

6楼2010-08-10 17:31:06
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tinaliang

银虫 (正式写手)

haichang(金币+1): 2010-08-11 18:37:50
会不会是蛋白含量太少,染色看不出来,你可以选择其他看蛋白方法。或者加大上样量
7楼2010-08-10 17:37:19
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boying0928

至尊木虫 (著名写手)

haichang(金币+1): 2010-08-19 10:03:27
1ug/ul 样品量很大了,应该考虑其他原因,要不放张图片上来!
热爱这里。
8楼2010-08-11 22:19:45
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真真xu

新虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲故,你得问题是怎么解决的,能不能分享一下~
9楼2016-03-14 10:40:10
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酒红色葡

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
亲,我和你差不多的

发自小木虫IOS客户端
10楼2016-05-17 15:28:02
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