应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DNA连接前后大小一样咋回事?
61/1返回列表
查看: 909  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

呆米11

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】DNA连接前后大小一样咋回事? 已有5人参与

各位虫友:我今天遇到一个问题想向大家请教一下:
   
我做基因克隆,用引物扩出来的片段是500bp,条带很清楚,我用T4连接酶,用的DH5a感受态细胞,做的连接,连完后做菌液PCR,电泳结果是都是在500bp处,有很亮的条带,如果连上了,条带肯定会大个一百多,如果没连上咋会有500的条带呢? 想问一下,这可能是什么原因?  谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-08-02 21:56:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你用的是通用引物检测的，还是原来的PCR引物啊，要是原来的PCR引物，应该就是500bp
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-08-02 22:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

被太阳追逐

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最好是提个质粒酶切或测序，个人感觉菌液或菌落pcr假阳性会很高
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-08-02 22:19:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmasylm

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用的是什么引物做的pcr检测，载体引物会大于500bp，如果是原片段引物就是500bp，建议lz做酶切鉴定，酶切比pcr可靠。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-08-02 23:20:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-08-03 05:52:49
我觉得应该是对的，你拿原先500的片段做对照，电泳时间长点，应该能看出来的。
直接测序吧  ！
赞一下(1人) 回复此楼
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
5楼2010-08-03 00:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

呆米11

金虫 (小有名气)
我用的是通用引物M13  RV  做的菌液PCR
赞一下 回复此楼
6楼2010-08-03 09:27:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 呆米11 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 280求调剂 +7 咕噜晓晓 2026-03-18 8/400 2026-03-21 01:27 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 287求调剂 +7 晨昏线与星海 2026-03-19 8/400 2026-03-20 22:19 by JourneyLucky
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +4 @taotao 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:14 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿北京化工大学0703化学318分，有科研经历，求调剂 +4 一瓶苯甲酸 2026-03-14 4/200 2026-03-20 20:36 by fen_rao
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂（0854都可以） +4 xbxudjdn 2026-03-18 4/200 2026-03-20 09:07 by 不168
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 材料工程专硕调剂 +5 204818@lcx 2026-03-17 6/300 2026-03-18 22:55 by 204818@lcx
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭