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jie878

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关 RNA 的问题 已有11人参与

RNA 容易降解吗?怎样检测它是否已被降解?最近在做一实验总是做不出现象,就想到是不是自己的 RNA 已经被降解了。请教各位虫友,有什么好的建议!
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被太阳追逐

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
看天(金币+5):又见处女贴 加5bb 2010-08-01 19:35:09
jie878(金币+3): 2010-08-01 19:59:13
很容易降解,可以跑个RNA电泳。
2楼2010-08-01 16:06:42
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)

jie878(金币+2): 2010-08-01 20:04:36
如果带型弥散,就是降解了。条带清晰,则没降解。
3楼2010-08-01 17:17:34
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jie878

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 被太阳追逐 at 2010-08-01 16:06:42:
很容易降解,可以跑个RNA电泳。

一般配 RNA 溶液时有什么具体要求吗?实验室没条件做电泳啊。
4楼2010-08-01 20:03:33
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


看天(金币+1):鼓励一下 2010-08-02 18:53:00
引用回帖:
Originally posted by jie878 at 2010-08-01 20:03:33:

一般配 RNA 溶液时有什么具体要求吗?实验室没条件做电泳啊。

没条件做电泳,还能做分子实验?后续实验也没法做啊,你提RNA之后做什么实验可以不用电泳
5楼2010-08-01 21:04:05
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ymzfeng

金虫 (小有名气)


看天(金币+1):鼓励一下 2010-08-02 18:53:14
没电泳条件那还怎么做实验啊
那你提RNA做什么用
6楼2010-08-01 21:37:44
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)

jie878(金币+5): 2010-08-02 18:39:39
跑个DNA胶也可以,把梳子、胶板等用乙醇泡一泡,晾干,电泳液换新的,上样量一般为1微克,跑个10分钟即可,然后在紫外灯下看看带型。
7楼2010-08-02 08:22:48
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tangw_007

银虫 (小有名气)

jie878(金币+2): 2010-08-02 18:46:26
RNA很容易降解的,保存到-80冰箱好一点
8楼2010-08-02 10:12:05
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jie878

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
看天(金币+3):你也鼓励一下 祝好 2010-08-02 18:53:42
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-08-01 21:04:05:


没条件做电泳,还能做分子实验?后续实验也没法做啊,你提RNA之后做什么实验可以不用电泳

我们是买的现成的RNA(公司合成的),它是一段适配体,能与特定的物质特异性结合,我们现在怀疑买来的RNA配成溶液后,保存在-20°C,是不是应经降解了。
9楼2010-08-02 18:45:47
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linxi8579

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by lixg at 2010-08-02 08:22:48:
跑个DNA胶也可以,把梳子、胶板等用乙醇泡一泡,晾干,电泳液换新的,上样量一般为1微克,跑个10分钟即可,然后在紫外灯下看看带型。

用乙醇泡一下有效果吗,RNA酶绝对去不了。一般电泳液是新的比较好把握,我都是直接跑了。或者用DEPC水配胶和缓冲液,但是很麻烦。用酒精可以吗?
10楼2010-08-02 20:47:18
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