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王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于电转酵母X33的问题 已有7人参与

我的表达载体是用的PPICZa,现在电转酵母X33感受态细胞,电压2000v,通电时间3~5ms,但是电转了很多次都得不到阳性转化子。电转的结果要么是不长菌,要么是正常时间里(隔一天长菌)长菌,但是菌落PCR检测全为阴性,不知道还有什么因素会影响电转效率??(基本可以确定我的感受态效果较好,线性化的产物浓度也很大,每80ul感受态加入10ul线性化产物)
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环境因子

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主 你的YPDZ平板Zeocin终浓度是多少?我的是100ug/mL,但是电转的空菌X-33能长一大片,挑单菌落在这个终浓度下的YPDZ液体培养基摇菌15h左右也长得浑浊了。不知道是不是我的抗生素或者菌有问题。
奋斗
11楼2013-11-20 14:27:56
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