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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR 总是没P出来
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR 总是没P出来 已有17人参与

各位虫友，我最近在做PCR，但是我总是没P出来，我的引物有点长，有75个bp，这个东西有影响吗？是不是应该在退火温度和退火时间上要注意一些啊？如果是的话应该如何确定退火温度和时间呢？还请高手指点。。。不胜感激。。。
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1楼 2010-07-02 17:02:06
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zsxnd

铁杆木虫 (著名写手)
★
amisking(金币+1):欢迎交流！ 2010-07-02 18:23:41
yangjunzju(金币+1): 2010-07-03 12:24:09
引物确实长，但是退火温度设定为60左右，然后增加循环数，先低温P几圈，后60多，多批几圈，或者加大点Mg的浓度！
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5楼2010-07-02 18:09:22
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