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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR 总是没P出来
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR 总是没P出来 已有17人参与

各位虫友，我最近在做PCR，但是我总是没P出来，我的引物有点长，有75个bp，这个东西有影响吗？是不是应该在退火温度和退火时间上要注意一些啊？如果是的话应该如何确定退火温度和时间呢？还请高手指点。。。不胜感激。。。
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1楼 2010-07-02 17:02:06
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木木803

金虫 (正式写手)
★ ★
yangjunzju(金币+1):倒是有这个可能性，没考虑这一点~~ 2010-07-03 15:02:49
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-07-03 20:27:39
引物有没有不利于退火的自身二级结构？我的意思是这么长的primer也许存在较长的stem，退火温度时打不开，就没法延伸了，呵呵

[ Last edited by 木木803 on 2010-7-3 at 14:39 ]
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12楼2010-07-03 14:38:23
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