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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR 总是没P出来
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yangjunzju

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】PCR 总是没P出来 已有17人参与

各位虫友，我最近在做PCR，但是我总是没P出来，我的引物有点长，有75个bp，这个东西有影响吗？是不是应该在退火温度和退火时间上要注意一些啊？如果是的话应该如何确定退火温度和时间呢？还请高手指点。。。不胜感激。。。
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1楼 2010-07-02 17:02:06
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ydgua

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★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yangjunzju(金币+1): 2010-07-03 12:24:13
你的目的片段的模板是什么？如果是质粒就应该好做，但如果是cDNA，再加引物这么长，可能会不好做。
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6楼2010-07-02 22:30:17
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ydgua

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yangjunzju(金币+1): 2010-07-03 12:24:18
退火问题你可以根据直接与目的基因配对的那部分序列来推算
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7楼2010-07-02 22:31:16
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