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【专题】real time pcr目的基因的融解曲线不明白
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liying6929
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专业: 动物形态学及胚胎学
[交流]
【专题】real time pcr目的基因的融解曲线不明白
已有8人参与
大家好
最近做实时定量,我的目的基因的融解曲线显示三个峰,在珠峰前面有一个小峰,后面有一个比主峰稍低的峰,但是将该反应后的样品跑电泳,只有特异的一条带这是为什么呢?
我用的仪器是ABI7500,试剂是 Takara的染料法
还有怎样手动调节ct值和阈值呢?
[
Last edited by liying6929 on 2010-6-23 at 23:38
]
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2010-06-22 22:52:14
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silicare
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小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):有可能。 2010-06-25 08:44:15
不排除 电泳的灵敏度造成
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6楼
2010-06-25 08:20:44
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pidou213
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专业: 农业昆虫学
是不是因为你的是家族基因呢?
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见得多爱的多
2楼
2010-06-22 23:15:46
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wywangying169
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):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-06-23 16:08:53
主峰前面的峰有可能是引物扩增引起的,后面的峰就不太清楚了,我用的7300,不知道9700怎么用!
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好好自学,好好工作
3楼
2010-06-23 16:06:22
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三磷酸腺苷
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reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-06-25 03:43:03
琼脂糖跑不出来极有可能是电泳分辨率的问题,一个是很难把长度这么接近的片段分开,一个是含量太低没能检出
但是qPCR是很灵敏的
PS:是7900……
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4楼
2010-06-23 16:16:48
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