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lly198784木虫 (正式写手)
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[交流]
【求助/交流】酶活测定求助 已有6人参与
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求助测：烟酸磷酸核糖转移酶（NAPRTase)的酶活测定方法。 它是催化烟酸=烟酸单核苷酸的反应的，过程中伴随有ATP+磷酸核糖焦磷酸=ADP+Pi+PPi。 一篇文献上是这样写的，但是我没有看明白。 Nicotinic acid phosphoribosyl transferase activity was measured following the formation of ADP. The reaction mixture contained 4.5 mM ATP, 1.5 mM phosphoribosyl pyrophosphate,45 mM potassium phosphate, pH 7.5, 45 mM Tris- HCl, pH 7.5, 15 mM MgCl2, 0.15 mM nicotinate [34], 4 mM phosphoenolpyruvate, 0.2 mM NADH, 13U lactate dehydrogenase,and 13 U pyruvate kinase. The reaction was started by the addition of nicotinate. The concomitant consumption of NADH (e340nm = 6.3 mM–1 cm–1) was monitored photometrically. 请大侠们指点指点，ADP的生成怎么测啊，没有说啊！ |
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xiaopeiliang
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3楼2010-06-26 22:26:20
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scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-26 23:21:05
lly198784(金币+1): 2010-07-09 10:59:25
scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-06-26 23:21:05
lly198784(金币+1): 2010-07-09 10:59:25
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不是很明白 我翻译下啊 英语很臭的 烟酸磷酸核糖转移酶（NAPRTase)的酶活测定方法以ADP形成来测定。反应体系中包括 4.5 mM ATP, 1.5 mM 磷酸核糖焦磷酸,45 mM 磷酸钾, pH 7.5, 45 mM Tris- HCl, pH 7.5, 15 mM MgCl2, 0.15 mM 烟酸 , 4 mM 磷酸烯醇丙酮酸盐(或酯), 0.2 mM NADH, 13U 乳酸脱氢酶,and 13 U 丙酮酸脱氢酶， 反应由烟酸的加法开始。 好像是直接把NADH替代了ATP，这不是实验原理是实验过程啊。 |
4楼2010-06-26 22:59:22
5楼2010-06-27 09:11:10
6楼2010-06-27 23:17:11
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