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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】酶活测定
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jackchen129

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】酶活测定 已有3人参与

文献里磷酸果糖激酶酶活测定成分（1毫升）如下：

50 mM imidazole/HCl pH 7, 0.05 mM ATP, 5 mM MgCl2,  0.125 mM NADH,  0.25  mM  F6P,  0.5  units  aldolase,  glycerophosphate  dehydrogenase  and triosephosphar  isomerase.

那么这里的反应物浓度是指反应混合液里各反应物的终浓度吗？

imidazole/HCl可用Tris-HCl代替吗？其它文献也有用Tris-HCl的。

另外，0.5 units的酶量具体是多少啊？怎么用体积或者浓度衡量？

谢谢！！！

[ Last edited by jackchen129 on 2010-5-4 at 15:30 ]
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1楼 2010-05-04 15:29:55
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-04 18:21:32
1、反应物浓度是终浓度。
2、酶量要自己用BCA或者Brandford法定量一下。
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2010-05-04 17:36:34
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):积极的虫友~~ 2010-05-04 18:22:20
Tris-HCl代替应该可以的。
units是活力单位，先计算该酶的活力，然后转换成体积。
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3楼2010-05-04 17:38:45
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zxl493

铁虫 (小有名气)
先得定义酶活力概念   这样就可以转化成体积了
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4楼2010-05-05 00:14:20
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