| 查看: 4270 | 回复: 27 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】表达载体构建不成功的原因已有15人参与
|
|||
| 目前在构建一个表达载体，经同样双酶切的目的基因和PPICZA已经获得，且表达载体是从以前构建好的载体中酶切下来的，所以不存在没切开的问题。现在将目的基因跟PPICZA连接，用了T4 连接酶和Solution1分别连接过，都能长菌，但没有要的阳性克隆，每次转化后摇24小时才能长出来，且可以长很多菌，但单菌落很小。感受态是没有问题的，实在不知道问题出在哪里，已经重复很多次了，都得不到成功的转化子。（以前成功将该目的基因与PPICZA连接过，但目的基因未去除信号肽）望大家来分享一下你们的宝贵经验！ |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有245人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
两个基因融合构建真核表达载体需要去掉信号肽吗?
已经有7人回复- 构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上
已经有54人回复
- 关于农杆菌单菌株/双质粒表达载体的构建问题
已经有14人回复
- 【求助/交流】表达载体pCAMBIA1304表达顺序看不懂
已经有12人回复
- 关于SiRNA表达载体构建的问题
已经有9人回复
- 表达载体的构建
已经有17人回复
- 表达载体构建的相关问题
已经有15人回复
- 已知全长基因怎样克隆并构建表达载体
已经有8人回复
- 为什么我做的酶切连接总是不长斑呢？
已经有24人回复
- 【求助/交流】目的基因连接表达载体后涂板不长菌
已经有11人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母表达载体的构建问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】连接表达载体PET-28A失败原因
已经有23人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母真核表达载体构建和连接的问题
已经有6人回复
chachaxionga
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 729.3
- 散金: 90
- 帖子: 308
- 在线: 194小时
- 虫号: 1018929
- 注册: 2010-05-15
- 性别: MM
- 专业: 兽医寄生虫学
13楼2010-06-09 12:43:57
chachaxionga
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 729.3
- 散金: 90
- 帖子: 308
- 在线: 194小时
- 虫号: 1018929
- 注册: 2010-05-15
- 性别: MM
- 专业: 兽医寄生虫学
14楼2010-06-09 12:45:25
chachaxionga
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 729.3
- 散金: 90
- 帖子: 308
- 在线: 194小时
- 虫号: 1018929
- 注册: 2010-05-15
- 性别: MM
- 专业: 兽医寄生虫学
21楼2010-06-14 11:43:04