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wuweibewin

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[交流] DNA的沉淀问题

DNA（CTAB法大量提取，用于Southern杂交）用无水乙醇（或异丙醇）沉淀，发现有两种形态，一是DNA抱成团状，可用剪头移液枪转移;另一则是成散絮状（碎片状），只能用离心的方法得到沉淀；
谁能解释一下不同形态形成的原因？是否与DNA浓度、质量、以及材料处理方法有关？

本人今年一月份所沉的DNA均呈团状，而最近提的却既有团状又有碎片状，有一次甚至都是碎片状。

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wuwei_hello@163.com

1楼2010-06-07 15:02:21

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wuweibewin

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引用回帖:

Originally posted by 夏洛特1988 at 2010-06-07 17:57:32:
楼主有没有考虑温度的影响，现在和一月份的温度上下相差超过十度啊！

还有楼主叙述的不详细，难道过去提取的和现在提取的DNA浓度质量，材料处理方式相差很大吗，楼主可否做一些重复性试验考察一下相关的条件的 ...

我所做的一月份和现在都是一样的！实验过程都完全一样，而且当时是初学，现在都提了好多次了。而且现在做的里面也有抱成团状的！应该不是温度原因

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wuwei_hello@163.com

5楼2010-06-07 20:39:14

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wuweibewin

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引用回帖:

Originally posted by wangfili at 2010-06-07 19:50:24:
应该不是温度的原因吧，在实验室做实验都是恒温的呀！我个人觉得把上两次实验过程中的所有因素都进行对比，看有没有存在差异的地方，然后再按照相同的条件进行第三次实验，毕竟两次实验还是不能说明问题的。希望有 ...

我也比照过，完全没有问题都是严格按照实验步骤操作的，以及各种细节方面也没考虑到有什么问题。我也曾想过是量的原因，可是在书中没找到相关介绍，但却有对两种情况的DNA转移的方法！可见《分子克隆》496页“分离平均大小为100-150kb的DNA”的b、c条！

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wuwei_hello@163.com

6楼2010-06-07 20:44:00

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