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herojunjie

铁虫 (小有名气)

[求助] DNA提取问题

酚提取DNA时酚/氯仿层与与水层有沉淀该如何处理啊？知道的朋友告诉一下，谢谢了，急急急
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1楼 2010-12-08 09:39:00
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dhd997

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【答案】应助回帖

herojunjie(金币+1, 博学EPI+1): 2010-12-09 08:33:13
酚/氯仿层与与水层
离心之后水层在上层，应把枪头深入到下面，吸走下层酚/氯仿层。
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
2楼2010-12-08 11:16:00
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dhd997

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【答案】应助回帖

herojunjie(金币+1): 2010-12-09 08:34:24
应注意少吸到水层，以免DNA丢失。可以残留少许下层的，重复操作一次
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3楼2010-12-08 11:16:49
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dog_608582

木虫 (正式写手)
herojunjie(金币+1): 2010-12-09 08:35:45
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-08 11:16:49:
应注意少吸到水层，以免DNA丢失。可以残留少许下层的，重复操作一次

好奇怪哦，我做的时候，怎么是吸的是水层。酚是用来去蛋白的，DNA是在水层。一般，在水层和酚之间有沉淀很正常，尽量不要吸到沉淀就可以了。
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4楼2010-12-08 16:21:42
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dhd997

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herojunjie(金币+1): 2010-12-09 08:34:57
引用回帖:
Originally posted by dog_608582 at 2010-12-08 16:21:42:

好奇怪哦，我做的时候，怎么是吸的是水层。酚是用来去蛋白的，DNA是在水层。一般，在水层和酚之间有沉淀很正常，尽量不要吸到沉淀就可以了。

我是重复操作一次，你可以看清楚吧。当然要的是水层啊。如果不重复操作一次的话，直接吸取水层，继续做就行了。尽量不要吸到蛋白质
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5楼2010-12-08 16:23:50
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dog_608582

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-08 11:16:00:
酚/氯仿层与与水层
离心之后水层在上层，应把枪头深入到下面，吸走下层酚/氯仿层。

可能更好的方式是把水层吸到新的离心管里面，然后用乙醇沉淀。然后直接扔掉酚氯仿
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6楼2010-12-08 16:24:46
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dhd997

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引用回帖:
Originally posted by dog_608582 at 2010-12-08 16:24:46:

可能更好的方式是把水层吸到新的离心管里面，然后用乙醇沉淀。然后直接扔掉酚氯仿

达到目的，节约耗材，就是目的
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7楼2010-12-08 16:25:32
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dog_608582

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by herojunjie at 2010-12-08 09:39:00:
酚提取DNA时酚/氯仿层与与水层有沉淀该如何处理啊？知道的朋友告诉一下，谢谢了，急急急

有时候，在提取DNA过程中，可能出现在水层与酚氯仿之间有沉淀，只要不要吸到沉淀就可以了。DNA在水层，酚氯仿是用来除去蛋白的。酚的密度和水的密度，自己可以查书，然后就知道是要上层还是下层。
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8楼2010-12-08 16:28:19
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