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herojunjie

铁虫 (小有名气)

[求助] DNA提取问题

酚提取DNA时酚/氯仿层与与水层有沉淀该如何处理啊?知道的朋友告诉一下,谢谢了,急急急

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dhd997

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【答案】应助回帖

herojunjie(金币+1, 博学EPI+1): 2010-12-09 08:33:13
酚/氯仿层与与水层
离心之后水层在上层,应把枪头深入到下面,吸走下层酚/氯仿层。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
2楼2010-12-08 11:16:00
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dhd997

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【答案】应助回帖

herojunjie(金币+1): 2010-12-09 08:34:24
应注意少吸到水层,以免DNA丢失。可以残留少许下层的,重复操作一次
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
3楼2010-12-08 11:16:49
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dog_608582

木虫 (正式写手)

herojunjie(金币+1): 2010-12-09 08:35:45
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-08 11:16:49:
应注意少吸到水层,以免DNA丢失。可以残留少许下层的,重复操作一次

好奇怪哦,我做的时候,怎么是吸的是水层。酚是用来去蛋白的,DNA是在水层。一般,在水层和酚之间有沉淀很正常,尽量不要吸到沉淀就可以了。
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4楼2010-12-08 16:21:42
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dhd997

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herojunjie(金币+1): 2010-12-09 08:34:57
引用回帖:
Originally posted by dog_608582 at 2010-12-08 16:21:42:

好奇怪哦,我做的时候,怎么是吸的是水层。酚是用来去蛋白的,DNA是在水层。一般,在水层和酚之间有沉淀很正常,尽量不要吸到沉淀就可以了。

我是重复操作一次,你可以看清楚吧。当然要的是水层啊。如果不重复操作一次的话,直接吸取水层,继续做就行了。尽量不要吸到蛋白质
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
5楼2010-12-08 16:23:50
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dog_608582

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-08 11:16:00:
酚/氯仿层与与水层
离心之后水层在上层,应把枪头深入到下面,吸走下层酚/氯仿层。

可能更好的方式是把水层吸到新的离心管里面,然后用乙醇沉淀。然后直接扔掉酚氯仿
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6楼2010-12-08 16:24:46
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dhd997

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Originally posted by dog_608582 at 2010-12-08 16:24:46:

可能更好的方式是把水层吸到新的离心管里面,然后用乙醇沉淀。然后直接扔掉酚氯仿

达到目的,节约耗材,就是目的
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
7楼2010-12-08 16:25:32
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dog_608582

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by herojunjie at 2010-12-08 09:39:00:
酚提取DNA时酚/氯仿层与与水层有沉淀该如何处理啊?知道的朋友告诉一下,谢谢了,急急急

有时候,在提取DNA过程中,可能出现在水层与酚氯仿之间有沉淀,只要不要吸到沉淀就可以了。DNA在水层,酚氯仿是用来除去蛋白的。酚的密度和水的密度,自己可以查书,然后就知道是要上层还是下层。
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8楼2010-12-08 16:28:19
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