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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】我的PCR
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liminsun_0

金虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】我的PCR 已有7人参与

之前一周PCR还没问题呢，这一周7天了，P了不下15次，中间还提取DNA，疯了，啥都没有，包括阳性对照和阴性对照，之前有引物自联现象，减少引物之后就没有了，但是该要的东西也没有了！唉，再不出结果我就要跳楼了！我用的程序：95度,5分钟；95度，30秒，55度，30秒，72度，1.5分钟，30个循环；72度，10分钟。
各位高手，帮帮忙吧！
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既然选择了远方，便只顾风雨兼程。
1楼 2010-06-04 21:12:40
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missyoumuch

木虫 (小有名气)
liminsun_0(金币+1):嗜酸自养混合菌 2010-06-10 21:42:16
楼主扩的是什么啊
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2楼2010-06-04 22:54:54
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missyoumuch

木虫 (小有名气)
★
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-06-04 23:22:04
我的提取DNA能扩出来，采用的巢式，一扩出来后总是在二扩条带那个位置有个非特异，也是扩了不下十次，退火都提高一度了，换了好多条件，没办法，也请高手指点迷津
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3楼2010-06-04 22:58:32
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
liminsun_0(金币+1):全换了，P了几天，昨天休息了一天，今天一下就出来了！唉 2010-06-08 16:15:02
liminsun_0(金币+1):DNA是用试剂盒提取的，应该没什么问题。 2010-06-10 21:42:53
基因组的质量挺重要的。。。要不你把所有的成分都换一下看看，是不是那个出了问题。。很奇怪啊！
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2010-06-05 00:54:34
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glidingwater

银虫 (小有名气)
liminsun_0(金币+1):好的，谢谢！ 2010-06-08 16:11:30
建议用MIX P一下
它的效率极高
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如果社会的黑暗侵蚀了学府，我该往何处？
5楼2010-06-05 08:58:15
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jasco

木虫 (正式写手)
liminsun_0(金币+2):酶只有两种，已经换过，今天又P出了一点，打算再接再励！！ 2010-06-08 16:12:55
1.引物是否合适，
2.有别的酶能换用一下么
3. touchdown
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6楼2010-06-05 09:04:18
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j2

木虫 (正式写手)
liminsun_0(金币+1):中途没换过什么，正经东西没有，引物扩增现象却明显！郁闷 2010-06-09 22:05:25
之前能出来，现在出不来？中途换过什么东西没？
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
7楼2010-06-05 10:14:19
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biogefart

木虫 (著名写手)
liminsun_0(金币+1):就是没有我要的带，有我肯定就不管其他的了。唉 2010-06-10 21:44:30
有没有你要的带？有的话直接回收就行了，何必管他有没有非特性条带？
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闹太套
8楼2010-06-05 10:29:00
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xyls6868

新虫 (小有名气)
祝楼主好运
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9楼2010-06-05 22:37:29
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