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【求助/交流】我的PCR
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liminsun_0
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[交流]
【求助/交流】我的PCR
已有7人参与
之前一周PCR还没问题呢,这一周7天了,P了不下15次,中间还提取DNA,疯了,啥都没有,包括阳性对照和阴性对照,之前有引物自联现象,减少引物之后就没有了,但是该要的东西也没有了!唉,再不出结果我就要跳楼了!我用的程序:95度,5分钟;95度,30秒,55度,30秒,72度,1.5分钟,30个循环;72度,10分钟。
各位高手,帮帮忙吧!
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【求助/交流】求助!大家帮我看一下我的PCR体系有什么问题没?
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既然选择了远方,便只顾风雨兼程。
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2010-06-04 21:12:40
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liminsun_0(金币+1):嗜酸自养混合菌 2010-06-10 21:42:16
楼主扩的是什么啊
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2010-06-04 22:54:54
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★
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-06-04 23:22:04
我的提取DNA能扩出来,采用的巢式,一扩出来后总是在二扩条带那个位置有个非特异,也是扩了不下十次,退火都提高一度了,换了好多条件,没办法,也请高手指点迷津
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2010-06-04 22:58:32
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liminsun_0(金币+1):全换了,P了几天,昨天休息了一天,今天一下就出来了!唉 2010-06-08 16:15:02
liminsun_0(金币+1):DNA是用试剂盒提取的,应该没什么问题。 2010-06-10 21:42:53
基因组的质量挺重要的。。。要不你把所有的成分都换一下看看,是不是那个出了问题。。很奇怪啊!
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几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
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2010-06-05 00:54:34
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liminsun_0(金币+1):好的,谢谢! 2010-06-08 16:11:30
建议用MIX P一下
它的效率极高
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如果社会的黑暗侵蚀了学府,我该往何处?
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2010-06-05 08:58:15
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liminsun_0(金币+2):酶只有两种,已经换过,今天又P出了一点,打算再接再励!! 2010-06-08 16:12:55
1.引物是否合适,
2.有别的酶能换用一下么
3. touchdown
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2010-06-05 09:04:18
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liminsun_0(金币+1):中途没换过什么,正经东西没有,引物扩增现象却明显!郁闷 2010-06-09 22:05:25
之前能出来,现在出不来?中途换过什么东西没?
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修炼ing,当虫仙……
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2010-06-05 10:14:19
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liminsun_0(金币+1):就是没有我要的带,有我肯定就不管其他的了。唉 2010-06-10 21:44:30
有没有你要的带?有的话直接回收就行了,何必管他有没有非特性条带?
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闹太套
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2010-06-05 10:29:00
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2010-06-05 22:37:29
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