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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大肠杆菌
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含章冰婵

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌 已有4人参与

请教各位：
        目前我正在做大肠杆菌的生长曲线，用的是稀释涂布法。可结果都不好，有的时间取的样做的稀释涂布，结果平板上是一个菌液没长，而有些菌落数（cfu）也不成10倍关系，更有甚者低稀释度的还比高稀释度的菌落数多。想请问你们是怎样做的呢？还有大肠杆菌的菌落形态如何呢？边缘是否整齐？在对数生长期时，大肠杆菌是否很长、较粗？非常急，先谢谢各位了~~~
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1楼 2010-05-24 23:05:41
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zhijianwang

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-29 09:24:28
计数最好是用平板浇铸法
你出现的这些情况最有可能是你稀释过程操作不过关
实验最重要的是要注意细节
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2楼2010-05-25 13:38:20
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yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
lstt09nk(金币+3):感谢交流~~ 2010-05-29 09:24:41
不成十倍关系是很正常的。一个菌落都没长的话你要考虑你的实验方法了，看是不是稀释得太小了，或者实验方法、器具或其他东西对大肠杆菌有抑制作用。

尤其是你说低倍数的比高倍数的还多，那你就得考虑你稀释液是否有问题了。比如从哪里获得的大肠杆菌，稀释液是否被污染或其他原因。

菌太少的话，建议降低单次稀释倍数，如5被递增洗漱，这样梯度就很明显了。

最后你说的粗和长是以什么为标准的？如果没有一个参照物的话很长，看起来就会很细；很粗，看起来就会很短。还有就是看你用多大的倍数看的，倍数越低，看起来就越短，倍数不够得话，看起来就是圆的。我做革兰氏染色的时候，看他的比例应该是很细长那种。就像，双汇火腿肠。
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今夜的寂寞，让我如此美丽。
3楼2010-05-25 21:46:56
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含章冰婵

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhijianwang at 2010-05-25 13:38:20:
计数最好是用平板浇铸法
你出现的这些情况最有可能是你稀释过程操作不过关
实验最重要的是要注意细节

非常感激，很可能还是我操作不过关吧~~
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4楼2010-05-26 10:29:50
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含章冰婵

金虫 (小有名气)

感谢

引用回帖:
Originally posted by yushanyou12 at 2010-05-25 21:46:56:
不成十倍关系是很正常的。一个菌落都没长的话你要考虑你的实验方法了，看是不是稀释得太小了，或者实验方法、器具或其他东西对大肠杆菌有抑制作用。

尤其是你说低倍数的比高倍数的还多，那你就得考虑你稀释液是 ...

Thank you very much！！我用的是100倍的物镜，目镜的倍数忘了。主要是我目前涂片看到的菌长短不一，主要还是短的占多数，而长的大概是短的三倍，但在长的中间没看到明显的隔膜，不知道你们看到的大肠杆菌有否这种现象。
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5楼2010-05-26 10:46:26
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zhmy26

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
光学显微镜下面看到的形态不一很正常，细胞可能处于不同的生长阶段。100倍的物镜，那就是油镜了？
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6楼2010-05-26 16:40:52
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含章冰婵

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zhmy26 at 2010-05-26 16:40:52:
光学显微镜下面看到的形态不一很正常，细胞可能处于不同的生长阶段。100倍的物镜，那就是油镜了？

是油镜，我现在看到的大肠杆菌是短的占多数，有少许长的，那些长的菌的长度基本上有视野的直径那么长，我觉得这应该不是大肠吧，再长也没有这么长呀。
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7楼2010-05-29 09:12:05
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