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含章冰婵

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌 已有4人参与

请教各位:
        目前我正在做大肠杆菌的生长曲线,用的是稀释涂布法。可结果都不好,有的时间取的样做的稀释涂布,结果平板上是一个菌液没长,而有些菌落数(cfu)也不成10倍关系,更有甚者低稀释度的还比高稀释度的菌落数多。想请问你们是怎样做的呢?还有大肠杆菌的菌落形态如何呢?边缘是否整齐?在对数生长期时,大肠杆菌是否很长、较粗?非常急,先谢谢各位了~~~
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yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3):感谢交流~~ 2010-05-29 09:24:41
不成十倍关系是很正常的。一个菌落都没长的话你要考虑你的实验方法了,看是不是稀释得太小了,或者实验方法、器具或其他东西对大肠杆菌有抑制作用。

尤其是你说低倍数的比高倍数的还多,那你就得考虑你稀释液是否有问题了。比如从哪里获得的大肠杆菌,稀释液是否被污染或其他原因。

菌太少的话,建议降低单次稀释倍数,如5被递增洗漱,这样梯度就很明显了。

最后你说的粗和长是以什么为标准的?如果没有一个参照物的话很长,看起来就会很细;很粗,看起来就会很短。还有就是看你用多大的倍数看的,倍数越低,看起来就越短,倍数不够得话,看起来就是圆的。我做革兰氏染色的时候,看他的比例应该是很细长那种。就像,双汇火腿肠。
今夜的寂寞,让我如此美丽。
3楼2010-05-25 21:46:56
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zhijianwang

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-29 09:24:28
计数最好是用平板浇铸法
你出现的这些情况最有可能是你稀释过程操作不过关
实验最重要的是要注意细节
2楼2010-05-25 13:38:20
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含章冰婵

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhijianwang at 2010-05-25 13:38:20:
计数最好是用平板浇铸法
你出现的这些情况最有可能是你稀释过程操作不过关
实验最重要的是要注意细节

非常感激,很可能还是我操作不过关吧~~
4楼2010-05-26 10:29:50
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含章冰婵

金虫 (小有名气)

感谢

引用回帖:
Originally posted by yushanyou12 at 2010-05-25 21:46:56:
不成十倍关系是很正常的。一个菌落都没长的话你要考虑你的实验方法了,看是不是稀释得太小了,或者实验方法、器具或其他东西对大肠杆菌有抑制作用。

尤其是你说低倍数的比高倍数的还多,那你就得考虑你稀释液是 ...

Thank you very much!!我用的是100倍的物镜,目镜的倍数忘了。主要是我目前涂片看到的菌长短不一,主要还是短的占多数,而长的大概是短的三倍,但在长的中间没看到明显的隔膜,不知道你们看到的大肠杆菌有否这种现象。
5楼2010-05-26 10:46:26
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