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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】设计全长的引物
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434744419

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】设计全长的引物 已有3人参与

最近想做基因过表达，但是锚定起始密码子和终止密码子设计的引物都得不到目的片段 所以想向起始子和终止子的两侧延伸设计引物，不知道可不可以！如果可以的话可以向两侧延伸多少个碱基设计引物呢？
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1楼 2010-05-10 17:24:04
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saturn100

木虫 (正式写手)
434744419(金币+1): 2010-05-10 17:33:10
应该可以的吧，可以从5‘ 或是3’UTR里面设计引物的，然后在引物的5‘端加上合适的酶切位点，连到载体上。
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2楼2010-05-10 17:27:24
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gastrodia

金虫 (正式写手)
434744419(金币+1): 2010-05-10 17:52:41
UTR部分设计引物可能会比ATG和TGA还要难，毕竟GC含量太低，你说你使用基于ATG和tga的引物都得不到条带，你的PCR本身没问题吗？是否有阳性对照可以确保你的cDNA没问题
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3楼2010-05-10 17:47:06
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434744419

金虫 (小有名气)
★
amisking(金币+1): 2010-05-11 08:15:19
cDNA没有问题！我做了阳性对照！只是引物设计的问题！
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4楼2010-05-10 17:52:29
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434744419

金虫 (小有名气)
怎样确定UTR区域 ！谢谢
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5楼2010-05-10 17:54:09
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gastrodia

金虫 (正式写手)
你把序列发给我，我的邮箱ronghua.xu08@gmail.com
我帮你看看
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6楼2010-05-10 21:31:37
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