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xuejinyz1

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】RT-PCR总是得不到目的条带已有9人参与

我做RT-PCR已经很久了,最近电泳检测一直是呈弥散状,始终无法得到目的条带。RNA的提取个人认为已经是可以的了,三条带明显可见,略微有些拖带。然后按照TAKARA反转录试剂盒进行操作,内参条带很好,目的条带没有。

对反转录条件做调整后,在100-300bp处隐约可见条带,但我的条带(约900bp)处没有任何东西。我觉得是引物的可能性非常大,不过换了很多次的引物,结果还是一样。

希望得到大家的帮忙,解决这个让我心碎的问题,谢谢!
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jasco

木虫 (正式写手)

★ ★
plantaqp(金币+2): 2010-05-01 01:38
你是根据mRNA序列,cDNA序列还是基因组DNA序列设计引物的?注意内含子的影响
7楼2010-04-28 17:07:26
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