24小时热门版块排行榜    

查看: 12195  |  回复: 7

木叶林森

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR凝胶电泳图分析 已有3人参与

如图,提取小鼠DNA后PCR凝胶电泳,结果出现两条带,上面的条带是目的DNA,但下面的那些又粗又亮的条带是什么啊?还有这样的PCR产物能用于基因测序吗?

PCR凝胶电泳图分析
DNA.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongyingwu

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
木叶林森: 金币+8, ★★★很有帮助 2017-11-24 15:39:02
前面的一般是引物二聚体,一般都有。PCR产物测序一般需要对应产物切胶纯化再测序吧。
2楼2017-11-22 11:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
木叶林森: 金币+15, ★★★很有帮助 2017-11-24 15:38:20
第一个问题,又粗又亮的是引物二聚体,既然引物已经合成,可以通过做一个退货温度梯度来尽量减少其形成。第二个问题,不知道你上样量是多少,目的条带亮度很弱。你可以将其送到测序公司试试看能否测出来。

发自小木虫Android客户端
3楼2017-11-22 11:51:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木叶林森

铜虫 (小有名气)

4楼2017-11-24 15:29:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木叶林森

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 渊博震天 at 2017-11-22 11:51:42
第一个问题,又粗又亮的是引物二聚体,既然引物已经合成,可以通过做一个退货温度梯度来尽量减少其形成。第二个问题,不知道你上样量是多少,目的条带亮度很弱。你可以将其送到测序公司试试看能否测出来。
...

取了2.5uL上样

发自小木虫Android客户端
5楼2017-11-24 15:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木叶林森

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hongyingwu at 2017-11-22 11:25:39
前面的一般是引物二聚体,一般都有。PCR产物测序一般需要对应产物切胶纯化再测序吧。

测序直接送PCR产物就行,不需要我自己纯化后再送测

发自小木虫Android客户端
6楼2017-11-24 15:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

引用回帖:
6楼: Originally posted by 木叶林森 at 2017-11-24 15:34:52
测序直接送PCR产物就行,不需要我自己纯化后再送测
...

对的,送样的时候说明即可。

发自小木虫Android客户端
7楼2017-11-24 17:21:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aliaaxmu2016

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

问题:
1.Marker都不亮;
2.条带没有刀切般的感觉,弥散严重;
解决:
1.Marker 按说明量加,有量化作用,再依照marker亮度拍照;
2.配一个高浓度的胶;
3.如果还不行,就是PCR扩增量太少,建议模板量单因素或者退火温度实验;
8楼2017-11-27 10:27:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 木叶林森 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
请填处理意见