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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » rna提取不出来
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陈小信

新虫 (初入文坛)

[交流] rna提取不出来 已有9人参与

小麦新鲜叶片rna提取在1000bp出来一片白，但看不到两条带

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1楼 2017-07-23 00:23:48
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

PattyGao

新虫 (小有名气)
★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-01 07:45:19
首先有带说明不是量不够多的问题，看到条带很弥散，说明已经降解了。对于降解这个问题需要注意的问题很多，管子枪头的处理还有自己的操作不够。
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陈小信
7楼2017-07-24 15:20:12
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DNA爱Dnase

新虫 (著名写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-23 09:24:25
降解了，确定材料是否新鲜，是否还存在RNA酶污染

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

陈小信
4楼2017-07-23 08:03:10
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残笙

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
现在买个普通国产剂盒就能提出来的

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5楼2017-07-23 14:03:48
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紫风舞鸢

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
降解了，拖带说明里面有杂质，需要多纯化几遍
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云中漫步
6楼2017-07-24 10:42:46
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stabilized

银虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
10楼: Originally posted by 陈小信 at 2017-08-01 01:11:11
就是用的试剂盒，会不会是电泳过程有问题？有的话您感觉问题可能会是什么？
...

电泳过程中仅换新的缓冲液就行了，应该没问题。
还是注重提取过程。
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陈小信
坚持！
14楼2017-08-01 09:24:58
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19900905

银虫 (初入文坛)
★
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降解那么严重应该是内源酶造成的，减少样品量或加大裂解试剂量试一下
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引物设计合成，qPCR实验
16楼2017-08-01 15:21:53
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upgo123

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
前两天我用细胞提RNA都提不出来，现在提出来了。我用的事Trizol法。现在觉得提不出来可能有两方面原因：样品和电泳液。
样品的话，建议增加样品量，条件允许的话，添加RNA酶抑制剂；电泳液的话，用DEPC配制TAE缓冲液，电泳的时候换新的。
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选择，然后坚持
17楼2017-08-01 18:14:42
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普通回帖

陈小信

新虫 (初入文坛)
rna提取不出来

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2楼2017-07-23 00:25:49
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陈小信

新虫 (初入文坛)
总是出来这种情况，请各位分析一下问题可能在哪

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3楼2017-07-23 00:26:31
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)
降解严重
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8楼2017-07-25 16:07:25
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陈小信

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2017-07-23 08:03:10
降解了，确定材料是否新鲜，是否还存在RNA酶污染

材料新鲜，提取过程中枪头买的真空包装的，点样的时候的枪头没处理过是以前剩的，buffer也是以前剩的，会不会问题出在这？

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9楼2017-08-01 01:09:18
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陈小信

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 残笙 at 2017-07-23 14:03:48
现在买个普通国产剂盒就能提出来的

就是用的试剂盒，会不会是电泳过程有问题？有的话您感觉问题可能会是什么？

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10楼2017-08-01 01:11:11
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