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陈小信

新虫 (初入文坛)

[交流] rna提取不出来 已有9人参与

小麦新鲜叶片rna提取在1000bp出来一片白,但看不到两条带

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PattyGao

新虫 (小有名气)

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-08-01 07:45:19
首先有带说明不是量不够多的问题,看到条带很弥散,说明已经降解了。对于降解这个问题需要注意的问题很多,管子枪头的处理还有自己的操作不够。

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7楼2017-07-24 15:20:12
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DNA爱Dnase

新虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-23 09:24:25
降解了,确定材料是否新鲜,是否还存在RNA酶污染

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4楼2017-07-23 08:03:10
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残笙

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
现在买个普通国产剂盒就能提出来的

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5楼2017-07-23 14:03:48
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紫风舞鸢

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
降解了,拖带说明里面有杂质,需要多纯化几遍
云中漫步
6楼2017-07-24 10:42:46
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stabilized

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by 陈小信 at 2017-08-01 01:11:11
就是用的试剂盒,会不会是电泳过程有问题?有的话您感觉问题可能会是什么?
...

电泳过程中仅换新的缓冲液就行了,应该没问题。
还是注重提取过程。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

坚持!
14楼2017-08-01 09:24:58
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19900905

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
降解那么严重应该是内源酶造成的,减少样品量或加大裂解试剂量试一下
引物设计合成,qPCR实验
16楼2017-08-01 15:21:53
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upgo123

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
前两天我用细胞提RNA都提不出来,现在提出来了。我用的事Trizol法。现在觉得提不出来可能有两方面原因:样品和电泳液。
样品的话,建议增加样品量,条件允许的话,添加RNA酶抑制剂;电泳液的话,用DEPC配制TAE缓冲液,电泳的时候换新的。
选择,然后坚持
17楼2017-08-01 18:14:42
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普通回帖

陈小信

新虫 (初入文坛)

2楼2017-07-23 00:25:49
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陈小信

新虫 (初入文坛)

总是出来这种情况,请各位分析一下问题可能在哪

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3楼2017-07-23 00:26:31
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xrxleisure

铜虫 (正式写手)

降解严重
8楼2017-07-25 16:07:25
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陈小信

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by DNA爱Dnase at 2017-07-23 08:03:10
降解了,确定材料是否新鲜,是否还存在RNA酶污染

材料新鲜,提取过程中枪头买的真空包装的,点样的时候的枪头没处理过是以前剩的,buffer也是以前剩的,会不会问题出在这?

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9楼2017-08-01 01:09:18
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陈小信

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 残笙 at 2017-07-23 14:03:48
现在买个普通国产剂盒就能提出来的

就是用的试剂盒,会不会是电泳过程有问题?有的话您感觉问题可能会是什么?

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10楼2017-08-01 01:11:11
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