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foreverjohn

金虫 (小有名气)

[求助] RNA提取，有些样品不能提取出来

最近想做酵母的RT-qPCR，制备了三个样品，其中一个为丰富营养条件下培养24h，另外两个为营养贫瘠条件下培养24h和48h小时，样品收集后（室温，大约操作30分钟，主要是取1ml菌液多管，并离心），然后液氮速冻，保存于- 70 度冰箱约1个星期，然后提取RNA，使用的是试剂盒，共提取了两次，效果如图，请高手指点下，营养贫瘠条件下培养的酵母RNA提取困难，怎么解决。

RNA提取.jpg
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1楼 2012-09-26 20:01:59
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beescity

至尊木虫 (著名写手)
我没有做过微生物的。围观一下，也学一些经验。
我做植物的时候，发现一些特殊的材料还是用trizol提取比较稳当。但是trizol的确很考手艺。但是有些材料用试剂盒提不出来。提出来总比提不出来好。
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2楼2012-09-26 22:49:10
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-27 13:45:14
没做过酵母，我只做过植物、细菌、蓝藻。用trizol做还没有出过问题。大多数提不好RNA是破碎不好。不过，我觉得酵母应该是好破的。你的营养贫瘠条件下的样品的生物量是不是比其它的少呢？也可能是在贫瘠条件下细胞比较小，细胞外结构更复杂造成破碎困难。你试试用TRIZOL提，要么破碎过程加长。
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3楼2012-09-27 07:19:42
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