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foreverjohn

金虫 (小有名气)

[求助] RNA提取,有些样品不能提取出来

最近想做酵母的RT-qPCR,制备了三个样品,其中一个为丰富营养条件下培养24h,另外两个为营养贫瘠条件下培养24h和48h小时,样品收集后(室温,大约操作30分钟,主要是取1ml菌液多管,并离心),然后液氮速冻,保存于- 70 度冰箱约1个星期,然后提取RNA,使用的是试剂盒,共提取了两次,效果如图,请高手指点下,营养贫瘠条件下培养的酵母RNA提取困难,怎么解决。

RNA提取.jpg
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beescity

至尊木虫 (著名写手)

我没有做过微生物的。围观一下,也学一些经验。
我做植物的时候,发现一些特殊的材料还是用trizol提取比较稳当。但是trizol的确很考手艺。但是有些材料用试剂盒提不出来。提出来总比提不出来好。
2楼2012-09-26 22:49:10
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-27 13:45:14
没做过酵母,我只做过植物、细菌、蓝藻。用trizol做还没有出过问题。大多数提不好RNA是破碎不好。不过,我觉得酵母应该是好破的。你的营养贫瘠条件下的样品的生物量是不是比其它的少呢?也可能是在贫瘠条件下细胞比较小,细胞外结构更复杂造成破碎困难。你试试用TRIZOL提,要么破碎过程加长。
3楼2012-09-27 07:19:42
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