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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA 提取
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daidai77

铁虫 (初入文坛)

[求助] RNA 提取

急求：各位大虾，小女子第一次提取RNA ,不跑电泳只为测其浓度，由于样本量比较少，提取的过程中并未见到明显沉淀，而用紫外吸收法测定含量时，260nm附近有杂乱的峰值，A260/A280比值也在1.6几？这样是不是说明RNA 被提取出来了呢？但是不知道为什么测定的含量值远远大于它应有的含量，求助求助求助
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1楼 2012-07-01 13:04:41
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
daidai77: 金币+1 2012-07-02 12:36:14
重新提吧，肯定是杂质很多。用于后续试验也是白浪费试剂。
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2楼2012-07-01 13:34:42
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daidai77

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2012-07-01 13:34:42
重新提吧，肯定是杂质很多。用于后续试验也是白浪费试剂。

我不做后续试验，只做到这一步，但是这个会是什么的影响呢？DNA？重新提过几次了，都是这个问题
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3楼2012-07-01 17:02:32
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l_h_10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果只是想知道RNA被提取出来了没有，还是跑个电泳看一下吧。另外你的样品是植物还是动物？是用试剂盒提取的吗？
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4楼2012-07-01 21:35:58
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daidai77

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by l_h_10 at 2012-07-01 21:35:58
如果只是想知道RNA被提取出来了没有，还是跑个电泳看一下吧。另外你的样品是植物还是动物？是用试剂盒提取的吗？

我没得跑电泳的设备，我是边缘人士，是藻类，是用trizol试剂盒提取的。上述描述的那种情况导致我无法判断是否提出来了，求教！
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5楼2012-07-01 21:37:28
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l_h_10

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的样本可以多一些吗？多一些的话，应该是可以看到沉淀的。
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6楼2012-07-01 21:51:52
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by daidai77 at 2012-07-01 17:02:32
我不做后续试验，只做到这一步，但是这个会是什么的影响呢？DNA？重新提过几次了，都是这个问题...

不做后续试验 那只是提取RNA有什么意义呢？
估计是杂蛋白没有去除干净
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7楼2012-07-01 23:02:12
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daidai77

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by stone2239 at 2012-07-01 23:02:12
不做后续试验 那只是提取RNA有什么意义呢？
估计是杂蛋白没有去除干净...

我不是做生物的，是边缘人士，只是需要这么一个指标，蛋白没去干净的话OD260/OD280不应该达标才对阿
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8楼2012-07-02 10:04:53
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daidai77

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by l_h_10 at 2012-07-01 21:51:52
你的样本可以多一些吗？多一些的话，应该是可以看到沉淀的。

我在想会不会是多糖造成的
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9楼2012-07-02 12:34:36
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nuoyaeva

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by daidai77 at 2012-07-02 11:04:53
我不是做生物的，是边缘人士，只是需要这么一个指标，蛋白没去干净的话OD260/OD280不应该达标才对阿...

1. 纯RNA，A260/A280的理想值是1.9-2.1.
2. 紫外吸收法测定含量时，260nm附近有杂乱的峰值，说明你提到的样本浓度不在你该方法的有效测定范围内，给的值没有参考意义。
3. 不明白你到底要干嘛...
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生活是美好的
10楼2012-07-02 14:48:13
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