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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 引物设计的问题
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梦渡轮回

铁虫 (小有名气)

[求助] 引物设计的问题 已有3人参与

引物设计让我又开始重新怀疑人生了——根据虫友们提供的方法我进行了一下引物设计通过Primer6软件设计出的引物是一个冲1200bp开始到1600bp的引物；生工免费设计的引物是从2bp到1600bp的位置，我到底该相信那个？哪位大神帮助我一下吧:cry   
CBHII：AY368688绿色木霉引物设计
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1楼 2017-03-23 09:28:04
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Pari9

新虫 (初入文坛)
没必要自己设计引物啊，你去查别人的引物序列，然后在primer 5验证一下，全匹配就可以用啦

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2楼2017-03-23 10:05:19
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a314919473

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一对引物才几十块钱，没必要这么纠结。
可以多设计几对，一起合成，做预实验也费不多少钱，还能节省很多时间。
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有你真好
3楼2017-03-23 13:49:36
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-27 06:33:09
你要获取的片段是多长，就从它的起始位置上游、终止位置下游合适的位置设计引物
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···
4楼2017-03-23 14:47:25
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固液分离
顶

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-03-23 19:28:27
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)
你的实验目的是啥，这么笼统别人都不知道你在做什么

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6楼2017-03-23 23:38:04
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半天云

新虫 (初入文坛)
软件和网站只是辅助验证一下，自己看一下基本差不多就可以了，我以前用软件设计，现在都是都在看哪个顺眼就选那段，基本上都没问题
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7楼2017-03-26 18:43:44
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小鱼于abc

新虫 (小有名气)
我觉得留两种方法，1找个靠谱的论文，2多设计几对

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8楼2017-03-26 23:12:30
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彼岸花开开花

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

省事的办法：查询相关文献中别人使用的引物，进行BLAST，看看是否单一可用，如果想自己设计，个人认为最好选取短片段，比较容易出好的结果
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9楼2017-03-27 10:43:27
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