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amberhwk

新虫 (小有名气)

[交流] 酵母质粒线性化问题

我用的是pPICZaA 质粒,目的片段900左右,重组以后用Sac I 线性化处理,电泳没有条带,这是哪里出了问题,一头雾水,而且重组质粒pcr 转化后的菌落pcr都是没问题

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amberhwk

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by mlbiosci at 2016-12-29 12:49:50
你指的是转化酵母后的,pcr没条带?有无阳性对照?能否确定酵母转化成功?

转化以后,提质粒,pcr都有条带,但是线性化没有,重组质粒浓度700,条带否聚在了最前面
酵母质粒线性化问题



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9楼2016-12-29 13:00:17
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amberhwk

新虫 (小有名气)

2楼2016-12-28 13:42:47
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yangxp2006

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
菌落PCR假阳性很高,你构建的很可能是空载体
3楼2016-12-28 20:49:50
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mlbiosci

新虫 (正式写手)

4楼2016-12-28 23:01:31
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