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XUMIN6891

金虫 (初入文坛)

[求助] 酵母表达

各位虫友们好！我想请问做毕赤酵母表达的虫友们一个问题，我最近一直在做酵母表达，可是一直没表达，很是郁闷；有朋友给我推荐一种方法，让我把线性化的质粒转到酵母细胞，2-3d长出菌落后，直接做菌落pcr鉴定，然后对正确的菌落直接做表达，就直接挑正确的菌落到BMMY培养基中进行诱导表达，但是我有个疑问是这样做的话，到哪步保存菌种呢？有谁用过这种方法吗，给指导一下谢谢啊！
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酵母表达纯化一站式解决！

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1楼 2012-10-16 20:27:36
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最后保存的菌落pcr鉴定后用于表达的菌株。不嫌麻烦前面就可以开始保存。
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2楼2012-10-17 07:18:02
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XUMIN6891

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2012-10-17 07:18:02
最后保存的菌落pcr鉴定后用于表达的菌株。不嫌麻烦前面就可以开始保存。

你好，我见有些人都是先不鉴定先大批量的筛选表达菌株，那直接就挑菌落到BMMY培养基诱导，那是不是在BMMY培养基中摇24小时候就可保存菌种呢？
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3楼2012-10-17 13:55:47
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by XUMIN6891 at 2012-10-17 13:55:47
你好，我见有些人都是先不鉴定先大批量的筛选表达菌株，那直接就挑菌落到BMMY培养基诱导，那是不是在BMMY培养基中摇24小时候就可保存菌种呢？...

大批量的24小时候就保存菌种那量也太大了，最后筛选到的应该保存的就一两株而已。
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4楼2012-10-18 07:56:24
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