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王木木2016

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达引物设计 已有2人参与

我要做原核表达,现在需要设计引物,为了让载体上的His-Tag能够翻译,就得让目的基因上的终止密码子去掉或是碱基突变终止密码子,有谁做过这个,哪个方法比较好呢

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祝福
2楼2016-11-25 19:10:19
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
终止密码子去掉比较好!!!

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3楼2016-11-25 20:32:42
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-25 22:07:55
要看你用什么载体,比如你用pET28a,前后都有标签。一般留一个就行了。如果你想要保留后面的标签,就一定要把终止密码子去掉,或者突变了。

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A right way maybe not a good way!
4楼2016-11-25 20:37:21
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王木木2016

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 我爱chi辣椒 at 2016-11-25 20:37:21
要看你用什么载体,比如你用pET28a,前后都有标签。一般留一个就行了。如果你想要保留后面的标签,就一定要把终止密码子去掉,或者突变了。

我用的pET29a,前后两个标签都需要留着,这样的话,删除终止密码子和碱基突变终止密码子,这两种方式哪个处理方式 对后续实验能更有利一些呢

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5楼2016-11-25 20:49:07
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 王木木2016 at 2016-11-25 20:49:07
我用的pET29a,前后两个标签都需要留着,这样的话,删除终止密码子和碱基突变终止密码子,这两种方式哪个处理方式 对后续实验能更有利一些呢
...

差别不大,哪种方便就用哪种。

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A right way maybe not a good way!
6楼2016-11-25 20:50:35
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王木木2016

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 我爱chi辣椒 at 2016-11-25 20:50:35
差别不大,哪种方便就用哪种。
...

好的  谢谢

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7楼2016-11-25 20:58:31
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 王木木2016 at 2016-11-25 20:58:31
好的  谢谢
...

不客气

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A right way maybe not a good way!
8楼2016-11-25 20:59:11
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王木木2016

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦想天行 at 2016-11-25 20:32:42
终止密码子去掉比较好!!!

突变终止密码子的碱基会有什么影响吗?

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9楼2016-11-25 20:59:56
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 王木木2016 at 2016-11-25 20:59:56
突变终止密码子的碱基会有什么影响吗?
...

如果活性中心在C段有可能会有影响

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10楼2016-11-25 21:04:27
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