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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 原核表达引物设计
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王木木2016

新虫 (小有名气)

[求助] 原核表达引物设计 已有2人参与

我要做原核表达，现在需要设计引物，为了让载体上的His-Tag能够翻译，就得让目的基因上的终止密码子去掉或是碱基突变终止密码子，有谁做过这个，哪个方法比较好呢

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1楼 2016-11-25 18:41:27
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-11-25 22:07:55
要看你用什么载体，比如你用pET28a，前后都有标签。一般留一个就行了。如果你想要保留后面的标签，就一定要把终止密码子去掉，或者突变了。

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A right way maybe not a good way！
4楼2016-11-25 20:37:21
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梦想天行

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
终止密码子去掉比较好！！！

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3楼2016-11-25 20:32:42
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王木木2016

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 我爱chi辣椒 at 2016-11-25 20:37:21
要看你用什么载体，比如你用pET28a，前后都有标签。一般留一个就行了。如果你想要保留后面的标签，就一定要把终止密码子去掉，或者突变了。

我用的pET29a，前后两个标签都需要留着，这样的话，删除终止密码子和碱基突变终止密码子，这两种方式哪个处理方式 对后续实验能更有利一些呢

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5楼2016-11-25 20:49:07
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我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王木木2016 at 2016-11-25 20:49:07
我用的pET29a，前后两个标签都需要留着，这样的话，删除终止密码子和碱基突变终止密码子，这两种方式哪个处理方式 对后续实验能更有利一些呢
...

差别不大，哪种方便就用哪种。

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A right way maybe not a good way！
6楼2016-11-25 20:50:35
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