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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC峰的保留位置不一致是什么问题？
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fannis

金虫 (正式写手)

[求助] HPLC峰的保留位置不一致是什么问题？ 已有8人参与

各位大神，

小弟最近用hplc分离样品，目前分离到最后只剩了简单的几个峰，流动相是乙腈和水。等梯度洗脱的时候，峰相对来说是可以分开的，但是每次峰的保留位置总是不太一致，忽前忽后，由于需要单独收集单个峰进行下一步的实验。所以想问一下各位，造成这种情况可能的原因是什么？

稍后上图。
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爱生活爱媳妇儿~
1楼 2016-09-20 00:38:45
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夜夜笙箫

铁虫 (小有名气)
前一针末到后一针始平衡时间够吗

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3楼2016-09-20 10:16:48
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shi102241218

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
梯度洗脱就是存在这个问题，真个没被办法，加标吧
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2楼2016-09-20 08:44:22
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夜夜笙箫

铁虫 (小有名气)
相对保留时间一致吗

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4楼2016-09-20 10:17:50
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fannis

金虫 (正式写手)
fannis: 回帖置顶 2016-09-30 10:51:25
引用回帖:
2楼: Originally posted by shi102241218 at 2016-09-20 08:44:22
梯度洗脱就是存在这个问题，真个没被办法，加标吧

结果如图所示。

平时我用另一根C18的柱子分离复杂的样品，出来的峰的保留时间基本上是一模一样的，前后进100个样基本都一致。但是接着分离，换了一根更精确的柱子，结果出来的峰时间还经常波动，基本每次都会不一样的。用的剃度是乙腈21%，水79%等剃度洗脱。
HPLC峰的保留位置不一致是什么问题？
Screen Shot 2016-09-19 at 9.03.32 PM.png
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爱生活爱媳妇儿~
5楼2016-09-20 11:08:09
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