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vanorazhao铁虫 (初入文坛)
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[求助]
HPLC 测 FB1 时遇到的问题(延长保留时间)
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我遇到了一个关于HPLC 测 FB1 时遇到的问题，望解答： 我使用的流动相是甲醇：0.1M NaH2PO4 = 77:23 ，ph = 3.3； 发射波长为335nm，激发波长为440；柱温为30度；进样量为20ul，流速为1ml/min。测得结果显示出峰时间为3.7min左右，之前几次检测的出峰时间是4.0min左右。由于出峰时间过早，我通过改变流动相的比例来延长保留时间，结果当甲醇：0.1M NaH2PO4 = 67:33时，在3.7min左右出现的是双峰（连在一起的）；当甲醇：0.1M NaH2PO4 = 57:33 是，分别在4min和6min处出现了一个峰，用不同浓度的FB1标样检测时两个出峰时间对应的峰的峰高和峰面积基本相同，无法确定目标峰，且用空白样检测时这两个位置的峰均大于标样的峰；当甲醇：0.1M NaH2PO4 = 40:60 时，前4min出现了一系列连续的峰，4min之后也没有完整的单峰。。。。 请问该怎样延长保留时间呢？（我用的是15mm的柱子，实验室没有合适的更长的柱子了） 万分感谢！ |
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