24小时热门版块排行榜    

查看: 2367  |  回复: 35

jasonwyb123

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC测试结果不一致,求解决方法!!

各位大虾,

小弟刚刚从事HPLC实验操作,不曾就遇见了一个比较杯具的问题,请各位给与支持和帮助。

我现在在做一个T3,C18的反向柱HPLC实验,结果在实验过程中,开始测定标准曲线的一些列浓度测定,一直到中间靠后的样品时均出现类似图1 的峰型,结果进行到后期,就出现了类似图2的峰型,前后如果同时吸取一管样品,也会这样。

图1为标准曲线的其中一个浓度-500mM,在HPLC开始时测定,刚平衡好柱子进行的第二管样品(该样品前已做BLANK,均没有这种峰出现)。
出现峰型如图1
图2为同样该管样品,只是在我试验将要结束时又跑了该管样品一针,图形变化较大。

纠结了很久,实验也做过重复,均是一样的问题。
请求帮助

图1



图2
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

jasonwyb123

金虫 (小有名气)

实验搞定, 试了很多方法,最后还是通过更换一下buffer,刚刚解决,还不知道是否稳定,先上来和大家分享一下,谢谢各位的帮助
35楼2012-05-23 09:38:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

dlp2000

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-05-16 09:03:22
你没说清楚,我觉得初步看是里面的两个成分。
啦啦啦啦
2楼2012-05-14 11:25:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasonwyb123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dlp2000 at 2012-05-14 11:25:10:
你没说清楚,我觉得初步看是里面的两个成分。

不是两个成分,如果是未酶解的,是不会在这个位置出现峰的,只有加了相应的酶才会有峰出现,
3楼2012-05-14 11:26:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-05-16 09:03:30
图一样品可能过载,也可能液相方法学耐用性低。
守候在风中的宁静。
4楼2012-05-15 13:02:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasonwyb123

金虫 (小有名气)

怎么木有人来帮忙啊?紧急求助啊
5楼2012-05-15 13:12:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasonwyb123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-15 13:02:05:
图一样品可能过载,也可能液相方法学耐用性低。

图1与图2是从一管样品中吸取进样的,唯一不同的地方就是第一针在实验开始的时候,第二针在实验快结束的时候
6楼2012-05-15 13:14:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

引用回帖:
6楼: Originally posted by jasonwyb123 at 2012-05-15 13:14:59:
图1与图2是从一管样品中吸取进样的,唯一不同的地方就是第一针在实验开始的时候,第二针在实验快结束的时候

第一针是否充分平衡?梯度还是等度?
守候在风中的宁静。
7楼2012-05-15 13:16:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjinglvde

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-05-16 09:03:38
是不是样品溶液不稳定啊
8楼2012-05-15 16:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dingjinglvde

木虫 (正式写手)

样品降解了,所以前面出现其他杂质峰
9楼2012-05-15 16:09:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guowq8834

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius: 金币+1, 谢谢! 2012-05-16 09:03:46
要么你跑到后面柱子比较脏了,这种问题我也遇到过,尤其如果是中药。也可能是你样品本身就不稳定。建议把柱子冲洗干净后再做一次,样品的测定不要间隔时间太远
10楼2012-05-15 16:15:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jasonwyb123 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +5 张vvvv 2026-03-15 7/350 2026-03-21 19:23 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +12 冬十三 2026-03-15 13/650 2026-03-21 19:07 by ColorlessPI
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
[考研] 280求调剂 +10 咕噜晓晓 2026-03-18 11/550 2026-03-21 17:40 by 学员8dgXkO
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 324求调剂 +5 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 5/250 2026-03-20 22:30 by 促天成
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +7 困于星晨 2026-03-17 9/450 2026-03-20 17:38 by 无懈可击111
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 材料专硕326求调剂 +6 墨煜姒莘 2026-03-15 7/350 2026-03-17 17:10 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
信息提示
请填处理意见