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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » HPLC测试结果不一致，求解决方法！！
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kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
使用流动相溶解样品，或者高水相溶剂溶解样品
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11楼2012-05-15 16:27:18
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zw0123456789zw

至尊木虫 (职业作家)

Felix Baumgartner Space Jump

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 3Q 2012-05-15 21:46:00
使用流动相溶解样品，加上保护柱。进样阀注意要时常清洗。
重复进样看看。
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12楼2012-05-15 19:02:23
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xinyue2011

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+1, 谢谢！ 2012-05-15 21:46:13
jasonwyb123: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢你的帮助啊，从你说的几个方面试了，很有收获 2012-05-23 09:40:54
哈哈 这个问题我遇到过 说说我的经验吧 有好几个办法：调节进样量，换流动相（估计你用的是国产的） 调节流动相比例 必要时重新做标准溶液 ，还有一个是 你的标准曲线用流动相稀释看看效果等等很多办法吧 流动相的ph 流动相的分离能力等等都需要考虑在内！
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13楼2012-05-15 19:55:14
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371147760

木虫 (著名写手)
首先要用流动相配药，
还有你的药物浓度是不是有点高了啊
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14楼2012-05-15 20:11:54
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yemingzhu007

金虫 (小有名气)
楼主你走BLANK没有出现怪峰，说明仪器系统没有问题。
从楼主的描述来看，最大的变量是时间。不知楼主你的样品稳定性如何，在试验过程中是否要求控温。
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15楼2012-05-16 08:13:49
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-05-15 13:16:41:
第一针是否充分平衡？梯度还是等度？

平衡好了，因为是新柱子，我是过夜平衡的。是等度洗脱的
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16楼2012-05-16 08:51:33
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dingjinglvde at 2012-05-15 16:09:25:
样品降解了，所以前面出现其他杂质峰

新配制的样品，不经过复杂的处理过程，直接加buffer稀释就可以了，应该不会是样品降解的，这个是标准液
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17楼2012-05-16 08:52:54
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by dingjinglvde at 2012-05-15 16:08:10:
是不是样品溶液不稳定啊

稳定的，是基本的buffer，样品平常都是保存常温的，只有配制好了之后才保存-20℃，我每次取一支，用完就丢掉了，不重复使用的
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18楼2012-05-16 08:53:57
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by guowq8834 at 2012-05-15 16:15:33:
要么你跑到后面柱子比较脏了，这种问题我也遇到过，尤其如果是中药。也可能是你样品本身就不稳定。建议把柱子冲洗干净后再做一次，样品的测定不要间隔时间太远

这个是新柱子，而且后面出现的峰型才是我想要的，和我拿到的文献上的峰型一致，我想的是拿后面的结果，
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19楼2012-05-16 08:55:11
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jasonwyb123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by kkbyb at 2012-05-15 16:27:18:
使用流动相溶解样品，或者高水相溶剂溶解样品

用流动相吗？我这个有个protocol的，是用的酶解样品的酶的buffer，这个buffer我单独跑过几次，没有影响的，而且我的流动相就是高水相的，就是水
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20楼2012-05-16 08:57:36
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