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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 碱裂解法提取质粒
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司门玄武

铜虫 (初入文坛)

[求助] 碱裂解法提取质粒 已有1人参与

加入酚氯仿混匀后离心，上层液体呈透明状态，下层液体呈黄色，加入两倍无水乙醇后没有质粒出现。

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2016-07-15 16:55:00
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-07-16 07:56:01
xn8008: 金币+1, 应助指数+1 2016-07-19 15:34:47
没有质粒出现是指没有看到絮状沉淀还是电泳检测没有条带？提不出核酸一般就是细胞破碎裂解有问题，或者沉淀过程有问题，或者材料量太少，如果不是以上问题，建议检查试剂是否有问题

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2楼2016-07-15 21:07:18
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司门玄武

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-07-15 21:07:18
没有质粒出现是指没有看到絮状沉淀还是电泳检测没有条带？提不出核酸一般就是细胞破碎裂解有问题，或者沉淀过程有问题，或者材料量太少，如果不是以上问题，建议检查试剂是否有问题
...

没有沉淀也没有条带

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3楼2016-07-15 21:20:22
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梅太奇阿拉干

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
司门玄武: 金币+2, ★★★很有帮助, 再试试 2016-07-16 18:23:30
司门玄武: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-07-18 21:18:56
引用回帖:
2楼: Originally posted by 梅太奇阿拉干 at 2016-07-15 21:07:18
没有质粒出现是指没有看到絮状沉淀还是电泳检测没有条带？提不出核酸一般就是细胞破碎裂解有问题，或者沉淀过程有问题，或者材料量太少，如果不是以上问题，建议检查试剂是否有问题
...

碱解法裂解时间不要太长，沉淀用等体积的异丙醇试试，溶解时纯水或TE buffer 65度预热一下

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4楼2016-07-15 22:23:17
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