应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于碱法裂解提取DNA
31/1返回列表
查看: 1251  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

776142

金虫 (正式写手)

[求助] 关于碱法裂解提取DNA

在使用合成的材料做大肠杆菌提取DNA的实验时，使用2ml pYD1的质粒在250bp以下处总出现亮带，OD值大于2.0，酶标仪测定含量得到了30微克，而用试剂盒才得到了6微克左右。操作过程中使用的是碱法裂解溶液1,2,3，都经过灭菌处理，而且严格按照冰浴、温和操作和时间控制等，然后12000g离心得到上清液，加入到我的萃取材料中振荡吸附，用1M的氯化钠洗脱，再加入2.5倍的乙醇沉淀-20度30分钟，20微升无菌水溶解。并且在加完溶液1,2，3后离心得到的上清液的OD值也在2.1左右，这里不知道对不对，希望有懂的同学帮助一下。曾经得到过正确的结果电泳图下方无杂带，OD值1.91得到了5微克，就是一直没重复出来。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-18 08:34:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

德国工兵铲

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
776142(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。期待你的精彩和更详细的解答。 2013-06-18 10:52:17
一般DNA OD值偏大是因为RNA没有除干净
赞一下 回复此楼
2楼2013-06-18 09:02:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

776142

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 德国工兵铲 at 2013-06-18 09:02:28
一般DNA OD值偏大是因为RNA没有除干净

在提取过程中DNA有降解吗？ 我在溶液1中加入了100微克每微升的酶，最后在溶解DNA沉淀的水中加入些能完全解决这个问题吗
赞一下 回复此楼
3楼2013-06-18 09:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 776142 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭