24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2433  |  回复: 12

woaiguozhen

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR产物连接不上载体啊 已有7人参与

虫友们,片段大小7000,想连入PCI载体,尝试分段连入不行,直接连也不行,操作肯定没问题,请问有没有什么好的方法啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

丸子白菜

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1先用pfu,做平端连接入PCR-BLUNT载体,然后切出来,连入你要的载体。
2如果直接PCR之后就连,确认一下你的片段末端是啥样的
5楼2016-03-22 04:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

gaoboshi2015

捐助贵宾 (初入文坛)


商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容

小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先你要确定你的目的片段没问题。在确定你的目的片段没问题的情况下,要选择好的载体。比如这款TOPO无缝克隆载体:http://changyubio.com/product/277246233
2楼2016-03-21 20:23:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暮色西荷

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以试试先连接T载体

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-21 20:51:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 暮色西荷 at 2016-03-21 20:51:14
可以试试先连接T载体

7000连T载体可以吗?

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
4楼2016-03-22 01:25:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

star013

新虫 (知名作家)


6楼2016-03-22 07:54:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

暮色西荷

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 我爱chi辣椒 at 2016-03-22 01:25:04
7000连T载体可以吗?
...

不知道,你可以看看说明书

发自小木虫Android客户端
7楼2016-03-22 13:18:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我爱chi辣椒

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 暮色西荷 at 2016-03-22 13:18:06
不知道,你可以看看说明书
...

应该可以的,相对来说你的目的基因变成载体了,而原载体就是目的基因了!

发自小木虫IOS客户端
A right way maybe not a good way!
8楼2016-03-22 13:20:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woaiguozhen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 暮色西荷 at 2016-03-21 20:51:14
可以试试先连接T载体

T载体不能直接连这么大的片段吧
9楼2016-03-22 13:47:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

woaiguozhen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 丸子白菜 at 2016-03-22 04:49:40
1先用pfu,做平端连接入PCR-BLUNT载体,然后切出来,连入你要的载体。
2如果直接PCR之后就连,确认一下你的片段末端是啥样的

片段末端是带A碱基的
10楼2016-03-22 13:49:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 woaiguozhen 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 食品工程专硕求调剂 +3 小张zxy张 2026-03-26 3/150 2026-03-27 01:14 by dgnhs
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 286求调剂 +3 lim0922 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:07 by 不吃魚的貓
[考研] 304材料求调剂 +3 钟llll 2026-03-26 3/150 2026-03-26 23:05 by Dyhoer
[考研] 一志愿北化求调剂 +3 Jsman 2026-03-22 3/150 2026-03-26 21:06 by ajpv风雷
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 266分求材料化工冶金矿业等专业的调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:16 by JourneyLucky
[考研] 340求调剂 +3 Amber00 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:57 by 不吃魚的貓
[考研] 考研调剂 +8 小蜡新笔 2026-03-26 8/400 2026-03-26 16:18 by dick_runner
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +5 kongweilin 2026-03-26 7/350 2026-03-26 14:37 by mapenggao
[考研] 0856求调剂 +8 zhn03 2026-03-25 9/450 2026-03-26 13:42 by zzll406
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 10/500 2026-03-26 13:11 by 公瑾逍遥
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
信息提示
请填处理意见