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PCR产物连接不上载体啊
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woaiguozhen
新虫
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专业: 肿瘤免疫
[交流]
PCR产物连接不上载体啊
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虫友们,片段大小7000,想连入PCI载体,尝试分段连入不行,直接连也不行,操作肯定没问题,请问有没有什么好的方法啊?
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1楼
2016-03-21 14:56:16
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woaiguozhen
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专业: 肿瘤免疫
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5楼
:
Originally posted by
丸子白菜
at 2016-03-22 04:49:40
1先用pfu,做平端连接入PCR-BLUNT载体,然后切出来,连入你要的载体。
2如果直接PCR之后就连,确认一下你的片段末端是啥样的
片段末端是带A碱基的
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10楼
2016-03-22 13:49:27
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gaoboshi2015
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先你要确定你的目的片段没问题。在确定你的目的片段没问题的情况下,要选择好的载体。比如这款TOPO无缝克隆载体:
http://changyubio.com/product/277246233
。
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2楼
2016-03-21 20:23:57
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暮色西荷
铁虫
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专业: 疫苗学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以试试先连接T载体
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3楼
2016-03-21 20:51:14
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我爱chi辣椒
木虫
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注册: 2011-12-02
性别: GG
专业: 植物生理与生化
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3楼
:
Originally posted by
暮色西荷
at 2016-03-21 20:51:14
可以试试先连接T载体
7000连T载体可以吗?
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A right way maybe not a good way!
4楼
2016-03-22 01:25:04
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