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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 如何检测提取DNA的含量?
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mumu_w2015

新虫 (初入文坛)

[交流] 如何检测提取DNA的含量? 已有11人参与

我用试剂盒提取DNA,用紫外紫外分光仪测浓度，这个分光仪读数不稳定，一个样品的DNA可以得到多个数据，我该相信哪个数据?有没有别的方法测了？谢谢！

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1楼 2016-03-19 07:42:52
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永恒_99

金虫 (正式写手)
★
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可以试试NanoDrop2000超微量分光光度计 用于测定核酸浓度 比较精准 而且微量1-2即可5微升
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4楼2016-03-19 21:44:24
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Cathering_w

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
得到多个数据是正常的，数据只是相近，Nano也是一样的，只能是估算，一方面是仪器不稳定，一方面是吸取的量的变化，可以根据电泳Marker中最亮条带浓度来比较判定，这个是最准的

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博士终于毕业了，未来还有什么困难能难得倒我呢！加油我得未来。
9楼2016-03-20 02:51:43
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小虫s

木虫 (小有名气)
★
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跑电泳，和marker比较亮度，可以大致估算一下

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2楼2016-03-19 07:49:06
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
4楼: Originally posted by 永恒_99 at 2016-03-19 21:44:24
可以试试NanoDrop2000超微量分光光度计 用于测定核酸浓度 比较精准 而且微量1-2即可5微升

那玩意根本不准，检测质量还可以

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5楼2016-03-19 22:15:04
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memorize1991

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本想说用分光光度计的，，但自从我检测的结果显示我的OD值有问题，但经过PCR跑胶后证明我结果没问题，就再也不敢用这个来确定有没有DNA，有多少DNA了。

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7楼2016-03-19 22:53:43
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oliviashane

新虫 (小有名气)
★
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Invitrogen Qubit 2.0 螢光計。個人感覺這個比nanodrop要精確和靈敏。

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8楼2016-03-20 01:54:21
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洁Jane

新虫 (初入文坛)
★
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我是做植物居群SSR的
我是直接pcr来检测DNA怎么样
有时候跑电泳的条带也不太靠谱。好多次dna电泳挺亮的，也没有杂带，可是pcr没有东西。有时候，电泳条带十分微弱，但是pcr可以出东西。
当然我也就是做做实验，没有深入研究为什么（主要是研究不来，问来问去也没人回答我）
起初做实验的时候，我也是特别在意OD值和电泳图。OD小的可怜，电泳总是跑不出传说中DNA质量好的亮带。一直在试各种方法兜兜转转好久。有一次受不了了，想说直接pcr看看。把没有亮带的，有亮带的都p了，结果有好多平时亮带微弱的倒是p挺好，而条带明明很亮也没有杂质的倒是没跑出来····我也不懂
但电泳总体还是可靠地。我是想说，如果这个试剂盒人家用的挺好（我是指同种或者近缘种）如果你的东西电泳啊，测的浓度之类的值啊，不满意的话，或许不必太纠结，往下走走试试（我不知道你是做什么的，所以允许我胡言乱语我做的SSR，感觉对dna要求不是很严格，并且对纯度要求胜于浓度）
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10楼2016-03-20 09:44:24
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prthefu

木虫 (著名写手)
★
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如2楼，你可以和marker的亮度对比一下。一般我们加的M的浓度是足够做实验用的，浓度是可以的，所以，如不需要具体的实验数据，你可以根据目的条带和marker亮度对比一下，来判断自己DNA浓度是否合适。
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nothing is impossible in this world，if you have the will to win，you can achieve anything
3楼2016-03-19 08:07:14
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w5239775hj

新虫 (初入文坛)
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引用回帖:
3楼: Originally posted by prthefu at 2016-03-19 08:07:14
如2楼，你可以和marker的亮度对比一下。一般我们加的M的浓度是足够做实验用的，浓度是可以的，所以，如不需要具体的实验数据，你可以根据目的条带和marker亮度对比一下，来判断自己DNA浓度是否合适。

怎么看浓度是否合适？一样亮就算刚刚好？

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6楼2016-03-19 22:24:18
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