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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » CTAB提取木头DNA量少杂质多，请问如何解决？
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赖苏亮

新虫 (初入文坛)

[求助] CTAB提取木头DNA量少杂质多，请问如何解决？

CTAB法提木头的DNA。电泳用0.7%的胶，第1、2孔用新鲜叶子作对照，3、4为干木头韧皮部；5、6为边材；7、8为心材。结果显示1、2、3、4、5有条带。但1的最前端有很亮的点，估计是没有加Rnase的缘故。其余材料DNA都很少。然后用NanoDrop 2000分光光度计检测。显示260/280为1.7~1.8左右。请问虫友有什么办法提高木头DNA产量并减少杂质？谢谢！

P.S第一次在论坛发帖，不知道电泳图片有没有发上来，请见谅。

电泳图片
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1楼 2012-07-21 11:54:22
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赖苏亮

新虫 (初入文坛)
求高人指导！！！！！！
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2楼2012-07-23 13:05:06
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jl860822

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
赖苏亮: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-07-25 09:35:27
建议以后提取时加RNase消化，并且在乙醇清洗的一步可以重复一次，试试洗掉一些杂质
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3楼2012-07-23 20:09:51
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xp198766

铁杆木虫 (著名写手)

小木虫职业打酱油滴~~！
我觉得，是不是可以酚仿再多一次。。
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4楼2012-07-23 20:13:20
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821991024

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
赖苏亮: 金币+2 2012-07-25 09:35:58
你可以先用75%的乙醇洗三遍，然后再用无水乙醇洗，这样杂质肯定很少
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5楼2012-07-24 10:45:13
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赖苏亮

新虫 (初入文坛)
???????:
5?: Originally posted by 821991024 at 2012-07-24 10:45:13
?????????75%?????????飬??????????????????????????????

我用75%的乙醇洗了两次，因为怕木???中的DNA太少。下次试试多洗一???，谢谢。
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6楼2012-07-25 09:31:46
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赖苏亮

新虫 (初入文坛)
???????:
3?: Originally posted by jl860822 at 2012-07-23 20:09:51
?????????????RNase????????????????????????????????Σ?????????Щ????

好的，到时候加RNase试试。
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7楼2012-07-25 09:33:14
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赖苏亮

新虫 (初入文坛)
怎么我自己的回复是乱码？
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8楼2012-07-25 09:34:08
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赖苏亮

新虫 (初入文坛)
谢谢楼上几位。
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9楼2012-07-25 09:34:55
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