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CTAB提取木头DNA量少杂质多,请问如何解决?
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赖苏亮
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CTAB提取木头DNA量少杂质多,请问如何解决?
CTAB法提木头的DNA。电泳用0.7%的胶,第1、2孔用新鲜叶子作对照,3、4为干木头韧皮部;5、6为边材;7、8为心材。结果显示1、2、3、4、5有条带。但1的最前端有很亮的点,估计是没有加Rnase的缘故。其余材料DNA都很少。然后用NanoDrop 2000分光光度计检测。显示260/280为1.7~1.8左右。请问虫友有什么办法提高木头DNA产量并减少杂质?谢谢!
P.S第一次在论坛发帖,不知道电泳图片有没有发上来,请见谅。
电泳图片
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2012-07-21 11:54:22
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jl860822
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专业: 生物化学
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感谢参与,应助指数 +1
赖苏亮: 金币+2,
★★★
很有帮助
2012-07-25 09:35:27
建议以后提取时加RNase消化,并且在乙醇清洗的一步可以重复一次,试试洗掉一些杂质
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3楼
2012-07-23 20:09:51
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赖苏亮
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虫号: 1816462
注册: 2012-05-14
求高人指导!!!!!!
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2楼
2012-07-23 13:05:06
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小木虫职业打酱油滴~~!
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红花: 25
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在线: 554小时
虫号: 1046859
注册: 2010-06-24
性别: GG
专业: 环境微生物学
我觉得,是不是可以酚仿再多一次。。
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4楼
2012-07-23 20:13:20
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专业: 生物化学
【答案】应助回帖
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赖苏亮: 金币+2
2012-07-25 09:35:58
你可以先用75%的乙醇洗三遍,然后再用无水乙醇洗,这样杂质肯定很少
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5楼
2012-07-24 10:45:13
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