| 查看: 1683 | 回复: 14 | |||
[求助]
出现非目的条带的原因 已有4人参与
|
|
请教一下，出现非目的的条带主要是可能是什么原因？ 对引物进行试验，结果是不可能出现条带的，可是还是出现了，是跟扩增程序有关系吗？ 左边是用95℃ 30s，58℃ 30s，72℃ 60s ，30个cycles扩增的，右边是95℃ 30s，54℃ 5min，72℃ 60s ，5 cycles；95℃ 30s，60℃ 30s，72℃ 60s，30个cycles。 左边不出现条带是正常的，可为什么右边拖带那么严重，是有非特异性条带出现吗？  3.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有225人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求解WB出现非特异性条带的原因
已经有3人回复
- 巢式PCR第二轮PCR总是出现非特异性条带，且目的条带不见？
已经有5人回复
- 电泳图上出现比目的条带大的条带
已经有4人回复
- 做western blot 出来的目的条带怎么这多，求解释 附图 非常谢谢
已经有2人回复
- Southern杂交，目的样品没有条带。求帮忙解释原因。。。
已经有3人回复
- 【租期/租妻】【国产经典动人的情感故事片】【HD国语】
已经有351人回复
- pcr切单一目的带回收后电泳出现两条带，再切目的带回收电泳还是两条带
已经有11人回复
- WB结果杂不出目的条带，只有特别亮的非特异性条带，求高手解释原因
已经有10人回复
- 菌液PCR出现非特异性条带是什么原因？怎么解决？
已经有2人回复
- 菌落PCR出现非特异性扩增，测序峰图出现套峰
已经有5人回复
- SOE pcr目的条带很暗，非特异条带很亮？
已经有10人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
- 【资料】做好电泳的关键技术及问题总结
已经有27人回复
- 【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】
已经有178人回复
- 【求助/交流】寻求用通用引物进行菌落PCR，无条带的原因
已经有3人回复
- 【sobereva个人文集】电子定域性的图形分析
已经有56人回复
- 有意义的硕士研究生阶段如何充实的度过
已经有260人回复
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
你这个模板应该是大片段或者基因组吧，你是如何确定引物是不可能有非特异性条带呢，看你的图，感觉不仅仅 是pcr条件的问题，更可能是引物质量不行。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-03-18 09:36:51
3楼2016-03-18 10:26:49
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2016-03-18 11:11:16
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
|
我懂你的意思，我们平时设计引物都是选定特定的一段序列来设计的，即在设计是显示没有非特异性结合的。但是到我们实际来进行pcr的时候，我们用的模板往往不紧紧是引物设计时的那一段序列，还有两边延伸很长的，这样引物设计时的得分之类就不一定有参考价值了。特别是基因组设计引物时，由于软件和电脑限制，把整个基因组拿来设计引物不太现实。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2016-03-18 11:14:29
6楼2016-03-18 16:29:51
7楼2016-03-18 16:33:13
8楼2016-03-18 16:33:48
9楼2016-03-18 16:36:01
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
10楼2016-03-18 18:35:21