| 查看: 1439 | 回复: 11 | |||
[交流]
关于表达一个蛋白 已有6人参与
|
|
我的目的基因连接了pet 32a，之前测序和pcr 鉴定正确，但是到了诱导表达的时候出了问题，正常情况取1－2ml 的菌制样，跑SDS PAGE 能看到明显的一条目的蛋白大小的条带，但是我的需要10ml的菌液离心下来菌，制样才能看到那个明显的条带。请问，有人能帮我分析分析么？（新人第一次发帖，在此谢过各路大神）图片的话，需要我就拷贝上传 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有89人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于酵母表达真菌蛋白的一些困惑！
已经有14人回复
- 请教关于蛋白表达兼容性的问题
已经有4人回复
- 关于细胞内蛋白定位的问题，和融合蛋白表达的问题，融合PCR问题
已经有5人回复
- 关于原核表达目的蛋白的问题
已经有8人回复
- 关于重组菌蛋白表达后镍柱纯化脱盐后的一个问题
已经有8人回复
- 关于膜蛋白表达纯化及结构解析的几个问题,求解答！
已经有4人回复
- 关于Rosetta(DE3)菌株用来做蛋白表达的相关问题。
已经有3人回复
- 有机合成的虫子跪求指点蛋白表达
已经有6人回复
- 想问一下关于用pET-32a载体表达小片段蛋白
已经有1人回复
- 关于重组蛋白的一些问题
已经有4人回复
- 关于原核表达his标签蛋白的纯化问题
已经有6人回复
- 关于鉴定蛋白天然构象
已经有2人回复
- 关于原核表达
已经有8人回复
- 关于Pet28a载体构建的质粒，蛋白表达量低是怎么回事。请大家帮忙
已经有8人回复
- 关于在表达蛋白和GFP蛋白之间的linker
已经有11人回复
- 【求助/交流】关于大肠杆菌中蛋白表达的问题
已经有9人回复
2楼2016-03-06 19:41:24
原海亮
木虫 (著名写手)
- 应助: 232 (大学生)
- 金币: 4607.4
- 散金: 3521
- 红花: 33
- 帖子: 1804
- 在线: 375.4小时
- 虫号: 1392705
- 注册: 2011-09-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
楼主是先取了1～2毫升没有检测到目的条带么，建议还是上图吧，不知道你摇瓶菌体诱导后的生长情况，诱导温度是多少？当然不同的蛋白表达情况也是不一样的，至少你还可以看到目的条带 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-03-06 19:48:34
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
楼主的意思是诱导表达量太少了所以才需要10ml菌液吗？ 可以试试把样品分成胞内蛋白、细胞碎片以及全细胞三个样品一起跑PAGE，看看是不是不可溶蛋白。 如果是可溶蛋白，那就要探究一下诱导的各个条件有没有问题了。 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2016-03-07 00:15:38
花花贝
金虫 (知名作家)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 4729.4
- 散金: 1270
- 红花: 22
- 帖子: 5903
- 在线: 905.3小时
- 虫号: 931160
- 注册: 2009-12-20
- 专业: 同步辐射技术及其应用
5楼2016-03-07 07:28:24
wjf7862203
铁虫 (小有名气)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 1634.9
- 散金: 1
- 红花: 1
- 帖子: 81
- 在线: 36.4小时
- 虫号: 1169295
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
- 专业: 基础兽医学
6楼2016-03-08 08:47:09
sdjnyxn123
银虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 18.8
- 帖子: 82
- 在线: 83.3小时
- 虫号: 3096694
- 注册: 2014-03-28
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
7楼2016-03-08 09:19:01
8楼2016-03-14 16:07:58
9楼2016-03-14 16:16:48
10楼2016-03-14 16:17:11
30