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分类	共搜索到 41 个相关话题(最多显示前5000个)	作者	最后发表

分子生物	qpcr跑不出来各位虫友，为什么我的pcr结果跑不出来呢？溶解曲线感觉没啥问题，但是就是有的跑得出来，有的跑不出来。我是反转录后在跑，浓度是1微克。69e3d1ab759cf79e3ccfc4f95a88521.jpg2b62c307d9dd...	陈三口	2023-12-08 12:57
分子生物	质粒灵敏度跑不出来合成的含病毒目的片段的质粒摇菌后提取跑QPCR，10倍倍比稀释，第一次跑第一个浓度（210的7次方）ct值有16；第二次第三次跑就到17~18，导致灵敏度（210的1次方）ct值高于38不合格。...	牛腻流利	2023-05-11 08:05
生物科学	qpcr假阳性各位友友，最近鄙人在做qpcr，但是假阳性严重。新的引物，新的水，而且已经好几天没有打开质粒模板了，但是空白跑出来还是30左右个ct值，溶解峰tm和样品一致。之前怀疑是气溶胶污染，所以都...	Word麻鸭~	2022-07-03 11:03
分子生物	qPCR问题求助科研小白刚开始做qPCR差不多一个月，也已经跑出来过一些氮循环相关的基因如：noszⅠ、noszⅡ、nirK等，目前在做的基因是amoA的古菌，但是遇到了一些问题解决不了，已经做过多次重复实验，且...	猫喝可乐	2022-04-06 02:29
分子生物	如何确定物种特异性序列我想的是设计松江鲈特异性引物，然后跑qPCR。...同源性比对的话，出来的是很多物种跟松江鲈相同或很相似的序列，那设计出来的引物跑PCR，扩增出来的片段不就不一定是松江鲈的嘛，那也就不能...	18428321179	2021-08-06 08:05
分子生物	第一次做qPCR，求赐教各位大佬，本人第一做qPCR，得到的结果不太好，不知道是什么原因，请求大家帮忙一起分析分析。目的基因参考别人文献，我在NCBI上blast了特异性可以，最后内参基因跑出来了（Ct值在24左右）...	觅觅觅777	2021-08-03 02:32
分子生物	qPCR熔解曲线求助各位老师大神帮忙看看是什么问题啊，引物也换过了，真的要是做不出来就要换课题了。还有我听说可以把qPCR完了之后的产物跑电泳，哪位大神有具体...	茴香馅儿	2021-04-07 08:33
分子生物	求教！...但之前同样的手法都能跑出来Ct18-19！但是自复工以来，同样提取得到的RNA，逆转之后跑实时PCR，内参MPPIA的Ct值都已经33以上，甚至高于35，或压根undetermined；targetgene全部都是undetermined，溶解曲线根本不规则。...	渔人图图	2020-05-08 09:08
分子生物	新手RNA电泳图，求指导建议！可是图2的m1也不平整，而且感觉都没跑开，挤在一起了，改善条件的话怎么入手？2、X样品几乎都没跑出来，是因为保存时候就降解了，或者收集样品时候没收集到吗？因为我觉得如果是操作原因，...	JoJoCat_oo	2020-04-21 01:29
分子生物	跑qpcr其它目的基因的都出来了，就内参没有扩出来，该怎么办 9月份开学就是研二的了，实验一直做不出来，很心急。...我的老师还要我做qpcr之前还要用引物和cCDA扩增一下，用来跑琼脂凝胶，看看分子量和blast上的分子量能不能对上，对上了，再做qpcr。...	七叶漂漂	2019-08-08 03:24
分子生物	qPCR测定质粒拷贝数但是标准曲线出来，发现P50质粒标准曲线与目的基因组偏差两个数量级，即10^5浓度下，基因组CT=16.7，质粒P50CT=25。...提取的质粒跑胶后发现出双螺旋条带外还有一个很亮的条带，是聚体？...	懦弱的青春	2019-01-09 07:31
分子生物	有没有在做lncRNA的小伙伴们？ qPCR能够跑出来并且上游基因表达的改变也会引起该基因表达水平的变化，所以虽然基础表达量比较低，但还是认为这个基因是可以被转录的，有研究的价值，但是PCR跑不出来，这是什么原因呢？...	灯火阑珊0818	2019-01-05 08:56
生物科学	答疑呀嘿丨P值、FDR、Q值有偏差，会对发文章有影响吗？ Q３－ｑPCR问：为何以前用动物组织跑PCR时内参在15左右，而把组织中的细胞提出来后再跑却常常是18-25，是同一个内参？...保证引物的扩增效率达到90%以上，就并不需要跑标准曲线，而对于刚开始...	华联科生物	2018-10-22 09:21
分子生物	RNAt提取浓度很低，怎么办这几天提RNA，对照能提出来2000...2.02260/230），我提了3,4次都提不高（提RNA新手），对照跑Actin扩增，有条带，但不是非常明亮，处理跑不出条带，最终想做Qpcr验证试验，大家帮忙看看，我下...	liuxiao616	2018-08-21 07:08
分子生物	qPCR大神看过来！然而qPCR跑出来的结果就是质粒只有前几个浓度还有，后面几个Ct值过高检测不到。请各位大神帮忙找下问题所在，多谢！微信图片_20180808104232.jpg微信图片_20180808104226.jpg微信图片_...	daming_yj	2018-08-08 02:49
分子生物	QPCR cq值太低是怎么回事？跑出来内参基因的cq值大概在4左右，目的基因的在14左右，好像都不是很理想的值？请问下应该会是哪一步出了问题？cDNA的浓度浓度用Nanodrop测出来是800ng左右	Hoross	2018-07-20 08:33
分子生物	绝对定量 qPCR 标准曲线数据分析最近在用qPCR测处理样品中的拷贝数，但是出现了不可避免的问题。请教一下qPCR...但是这样做了几次发现，每次用标准样品得到的线性方程都会有微小的差异，算出来的处理样品中拷贝数会差很大。...	qiaoqiao1223	2018-05-07 04:49
分子生物	用枯草芽孢杆菌的菌液做qPCR做了个什么鬼出来啊这么折腾都没有结果……还有一个很奇怪的点是有几个样没有Ct值却跑核酸胶显示有正确大小条带，很奇怪？我怀疑是不是退火温度太高，于是将退火...是不是直接提取全DNA以此为模板才能扩增出来？...	jessy_zxy	2018-03-14 06:34
分子生物	qPCR退火温度退火温度是60时，我的溶解度曲线是第一张图。...结果是图二（Tm＝75.92）我的目的基因是180bp，跑了一个琼脂糖凝胶，只出来了一个不到100bp的带。亲们我该怎么办，改变什么条件呢！	懒懒姑娘	2018-01-27 07:44
分子生物	找不到合适的内参怎么办在这种情况下各组内参基因跑出了差距很大的CT值，跨度7-13不等，理论上来说，不应该埃...前前后后，我已经提了两次RNA，用了不同的逆转录试剂盒，最终跑出来的趋势基本一致：CT内参实验组。...	18288973959	2018-01-22 04:48
微生物	总RNA和总DNA跑qPCR的16S能否通过最终拷贝数的差异确定RNA在活菌... 问题太长，标题打不下完整提问：通过总RNA反转录cDNA和总DNA跑qPCR的16S能否通过最终拷贝数的差异确定RNA在活菌的体现上优于DNA问题有些长，新人币不多，全部贡献出来，求交流！首先有个...	小小一颗栗	2017-12-13 04:33
微生物	PCR扩增的问题我做的是海洋生物固氮，需要用qPCR进行定量。按照文献中的引物进行扩增提取了质粒，然后测序发现正向引物和反向引物都对。就按照文献中的探针去合成了，今天做了下结果没跑出来。对比了下...	wuchao924929	2017-10-14 12:37
硕博家园	QPCR不出Ct值各位大神，我最近一直在做Qpcr，可是一直都出不来Ct值，跑出来的扩增曲线是逐渐下降趋于平稳而不是S型曲线，而且也没有Ct值出来。请问这是为什么，有什么可能的原因吗？[eimg]2017/0624/w...	昆玉	2017-06-24 05:11
分子生物	关于绝对荧光定量PCR的相关问题，求教一直都在75%左右徘徊，标准质粒测过浓度和纯度，测过序列跑过PCR都没问题，稀释...1.经常做QPCR或者做过AOAAOB的同学能不能给点建议指出问题所在和改进方法，感觉做AOAAOB的人特别多的，谢谢...	点点招财猫	2017-06-03 09:06
分子生物	QPCR单峰、后面发现模板有基因组污染 QPCR单峰、后面发现模板有基因组污染，查了下引物，上下游都没有跨外显子，但是扩的条带中间夹了内含子（900...这样子的话如果基因组被扩出来那么条带大小就会不一样、那是不是就会出现双峰？...	kidult_SJ	2017-04-20 08:42