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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » RNAt提取浓度很低，怎么办
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liuxiao616

金虫 (小有名气)

[求助] RNAt提取浓度很低，怎么办已有2人参与

求教了，介绍下情况，试验材料（草本植物茎秆）在-60℃冰箱中保存了2年多了（别人采的材料），这几天提RNA，对照能提出来2000多吧（核酸仪测定的），还算正常，有一个处理只能提出来263（2.03   260/280；2.02   260/230），我提了3,4次都提不高（提RNA新手），对照跑Actin扩增，有条带，但不是非常明亮，处理跑不出条带，最终想做Qpcr验证试验，大家帮忙看看，我下一步该怎么做？
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1楼2018-08-21 15:20:08
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zhouluoxia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-09-05 20:31:47
你的目的是什么？是为了提出更高浓度的RNA，还是需要高浓度的RNA?对照条带不亮，可能是降解了。实验组的可以增加上样量试试。
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2楼2018-08-21 17:28:19
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liuxiao616

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouluoxia at 2018-08-21 17:28:19
你的目的是什么？是为了提出更高浓度的RNA，还是需要高浓度的RNA?对照条带不亮，可能是降解了。实验组的可以增加上样量试试。

目的是提取RNA，后续做Qpcr验证实验
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3楼2018-08-22 09:29:36
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createfeng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

很大可能是降解了，经验不足，看看其他朋友有没有好办法
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4楼2018-09-05 16:33:26
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果是263 ng/ul。不算特别低了。qPCR能做
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Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
5楼2018-09-05 20:32:40
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王玉哈哈哈

新虫 (正式写手)
你是用什么方法提的，可以试试换换方法   用CTAB 法试试
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6楼2018-10-22 16:44:05
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