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wuchao924929

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增的问题

各位,小弟新学分子生物学。好多问题一头雾水。我做的是海洋生物固氮,需要用qPCR进行定量。按照文献中的引物进行扩增提取了质粒,然后测序发现正向引物和反向引物都对。就按照文献中的探针去合成了,今天做了下结果没跑出来。对比了下中间的序列和探针序列,结果发现中间序列和探针序列不一样,碱基差异的比较多。悲剧了!我查询的文献中的序列和探针都用了无数回了,但我这回用的就不对了。我想请问下,用特异性的引物进行PCR,也能扩增出不同的条带吗?即两端的引物是一样的,中间的序列不对?
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